Una terapia novedosa para tratar las alergias: un anticuerpo biespecífico captador de células T reactivo frente a células productoras de IgE

La inmunoglobulina E (IgE) es un mediador clave de las enfermedades alérgicas, que en sus diversas formas afectan a casi el 30% de la población. El omalizumab, aprobado por primera vez en Europa en 2005, es el principal anticuerpo terapéutico para el asma alérgico y la urticaria crónica espontánea. Al interactuar con la IgE soluble, bloquea su unión a los receptores FcεRI de los mastocitos y los basófilos, evitando la degranulación celular que libera moléculas proinflamatorias y provoca los síntomas alérgicos. Enfoques alternativos han intentado establecer a las células productoras de IgE como diana terapéutica, lo que puede aliviar preocupaciones sobre toxicidad colateral, haciendo así posibles dosis tolerables más altas, una frecuencia de administración reducida y el acceso un rango de población más amplio. Paralelamente, recientemente los anticuerpos biespecíficos de células T (TCE-BsAbs) han aportado un marco revolucionario para dirigir el potencial destructivo de las células T (comúnmente estimulado a través de la activación vía CD3) hacia células específicas. En esta tesis, tratamos de implementar 15cl12, previamente conocido por su afinidad por el dominio proximal de la membrana externa (EMPD) de IgE en la forma de receptor de células B, como un TCE-BsAb en formato de inmunoglobulina G completo, para lograr una vida media más larga in vivo que podría mejorar la potencial actividad terapéutica. El objetivo principal era evaluar la activación de las células T desencadenada por el uso de OKT3 como anticuerpo anti-CD3 junto con 15cl12 en formato bsAb, en presencia de células de Ramos EMPD-positivas. Para ello, hemos producido 15cl12/OKT3 y bsAbs de control y hemos examinado sus propiedades biofísicas. Los resultados de los experimentos de unión a la superficie celular confirman la correcta especificidad para las células diana y efectoras. Sin embargo, nuestro anticuerpo no ha conseguido potenciar una activación específica de las células T, sobre lo cual se han analizado posibles explicaciones y perspectivas futuras para el proyecto. Como conclusión, proponemos que al mejorar la afinidad del brazo 15cl12, este TCEBsAbs podría convertirse en un candidato terapéutico prometedor para el tratamiento de trastornos alérgicos graves. Abstract Immunoglobulin E (IgE) is a key mediator of allergic diseases, which in their various form affects almost 30% of the population. Omalizumab, first approved in Europe in 2005, is the main therapeutic antibody for allergic asthma and chronic spontaneous urticaria. By interacting to soluble IgE, it blocks its binding to FcεRI receptors on mast cells and basophils, which otherwise triggers cell degranulation that releases proinflammatory and causes allergic symptoms. Alternative approaches have attempted to establish IgE-producing cells as a therapeutic target, which may avoid concerns about off-target toxicity, this implying higher tolerable dosages, reduced administration frequency and accessibility to a wider population range. Parallelly, T-cell engager bispecific antibodies (TCE-BsAbs) have recently provided a revolutionary framework for directing the serial killing potential of T-cells (commonly achieved through CD3 activation) towards specifically- targeted cells. In this thesis, we are implementing 15cl12, a previously known binder of the external membrane proximal domain (EMPD) of IgE in the B-cell receptor form, as a TCE-BsAb in full-IgG-like format, to achieve longer half-life in vivo that could enhance potential therapeutic activity. The main goal was to assess the T-cell activation triggered by using OKT3 as anti-CD3 antibody together with 15cl12 in bsAb format, in the presence of EMPD-positive Ramos cells. For this, we have produced 15cl12/OKT3 and control bsAbs and examined their biophysical properties. Results from cell surface staining experiments confirm correct specificity for target and effector cells. However, our antibody was not able to enhance a specific T-cell activation. Possible explanations and prospects for the project were suggested. As a conclusion, we propose that by improving 15cl12-arm affinity, this TCEBsAbs could become a promising therapeutic candidate for the treatment of severe allergic disorders