Búsqueda de nuevos antifúngicos con potencial de producción industrial para el control de fitopatógenos de cultivos de importancia en Colombia

La necesidad de agentes seguros y efectivos en el control de plagas y enfermedades, debido a la rápida emergencia de hongos patógenos resistentes a los fungicidas y antibióticos disponibles actualmente, ha incrementado la búsqueda de nuevas alternativas. Las condiciones particulares del país lo constituyen en un amplío recurso de agentes naturales para el control biológico. Este estudio es una etapa previa en la producción industrial de biocontroladores. Se realizo el tamizaje de una colección de microorganismos, buscando antifúngicos para el control de: Fusarium oxysporum f.sp. dianthi raza 2, Alternaria sp. y Botrytis sp., fitopatógenos del clavel y otros cultivos de importancia en Colombia. Mediante pruebas de antagonismo in vitro, se seleccionaron dos aislamientos de Bacillus subtilis, tipificados molecularmente, los cuales presentaron secreción de metabolitos antifúngicos al medio de cultivo, antago nismo diferente al cambio de pH del medio, termoestabilidad, resistencia a proteinasa K, actividad fungistática y celulolítica moderada. Se establecieron las condiciones cinéticas bajo parámetros constantes de agitación y en estático de crecimiento, estableciendo la eficiencia de la actividad de acuerdo al tiempo de producción y evaluando dos medios de cultivo, a través de las técnicas de discos de papel y actividad en tubo. Se aisló parcialmente el agente antifúngico del filtrado haciendo extracciones con éter de petróleo, diclorometano y acetato de etilo, se concentraron y se determinó su posible naturaleza proteica mediante un cromatografía de capa delgada revelada con ninhidrina y, calculando sus frentes de corrido para ser comparados con los algunos de los antifúngicos reportados para B. subtilis. Las propiedades presentadas por los agentes antifúngicos mediante esta caracterización parcial, hace pensar que probablemente pertenezcan a la familia Iturin y surfactin, una gran variedad lipopéptidos compuestos por siete aminoácidos y una cadena de ácido graso, generalmente de 14 carbonos. debido a la rápida emergencia de hongos patógenos resistentes a los fungicidas y antibióticos disponibles actualmente, ha incrementado la búsqueda de nuevas alternativas. Las condiciones particulares del país lo constituyen en un amplío recurso de agentes naturales para el control biológico. Este estudio es una etapa previa en la producción industrial de biocontroladores. Se realizo el tamizaje de una colección de microorganismos, buscando antifúngicos para el control de: Fusarium oxysporum f.sp. dianthi raza 2, Alternaria sp. y Botrytis sp., fitopatógenos del clavel y otros cultivos de importancia en Colombia. Mediante pruebas de antagonismo in vitro, se seleccionaron dos aislamientos de Bacillus subtilis, tipificados molecularmente, los cuales presentaron secreción de metabolitos antifúngicos al medio de cultivo, antago nismo diferente al cambio de pH del medio, termoestabilidad, resistencia a proteinasa K, actividad fungistática y celulolítica moderada. Se establecieron las condiciones cinéticas bajo parámetros constantes de agitación y en estático de crecimiento, estableciendo la eficiencia de la actividad de acuerdo al tiempo de producción y evaluando dos medios de cultivo, a través de las técnicas de discos de papel y actividad en tubo. Se aisló parcialmente el agente antifúngico del filtrado haciendo extracciones con éter de petróleo, diclorometano y acetato de etilo, se concentraron y se determinó su posible naturaleza proteica mediante un cromatografía de capa delgada revelada con ninhidrina y, calculando sus frentes de corrido para ser comparados con los algunos de los antifúngicos reportados para B. subtilis. Las propiedades presentadas por los agentes antifúngicos mediante esta caracterización parcial, hace pensar que probablemente pertenezcan a la familia Iturin y surfactin, una gran variedad lipopéptidos compuestos por siete aminoácidos y una cadena de ácido graso, generalmente de 14 carbonos.The necessity of finding safe and effectives agents to control of pests and diseases in plants, due to the quick emergence of fungal pathogens resistant, to fungicides and available antibiotics, has increased the search of new alternatives. The conditions peculiar to Colombia, malce it a broad source of potential natural age nts for biological control. This is a preliminary study in the search industrial production of biocontrollers. We screened a collection of microorganisms, for antifungal activity against Fusarium oxysporum f.sp. dianthi race 2, Alternaria sp. and Botrytis sp., phytopathogens of the carnation and other crops of importance in Colombia. In vitro antagonism assays identified, two strains of Bacillus subtilis strains which secreted antifungal metabolites to the culture media. This antifungal activity was fungistatic, worked independent of pH, and was resistant to heat, and proteinase K. These strains also presented moderate celulolitic activity. An evaluation on growth parameters, under different incubations conditions, established that optimum antifungal activity was obtained whit strain incubation in Sabouraud media. The secreted metabolites were extracted with different solvents and separated on thin layer chromatography plates. Calculations of the migrations fronts of the different spots allowed a comparison whit antifungal reported for B. subtilis and indicated that the activity detected here might belong to the family Iturin and Surfactin. The properties presented by the agents antifungics by means of this partial characterization, we makes think that they probably belong to Surfactin and Mycosubtilin. This family includes a lipopeptides of seven amino acids and a fatty acid, generally of 14 carbons.Microbiólogo (a) IndustrialPregrad