Estudo comparativo do efeito do meio condicionado de células estromais mesenquimais derivadas da derme e do tecido adiposo humanos no reparo cutâneo in vitro

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2018.As células estromais mesenquimais (CEM) são células multipotentes encontradas em vários tecidos do organismo humano. A facilidade de obtenção e isolamento, alta capacidade de propagação em cultura e de migrar para locais de lesão, facilita a utilização destas células para possíveis aplicações terapêuticas. As CEM estão envolvidas no processo de reparo tecidual principalmente de forma parácrina, ou seja, pela secreção de fatores solúveis. Por este motivo, diversos estudos sugerem que as CEM podem ser substituídas pelo seu meio condicionado (mc), o qual contém fatores solúveis e vesículas extracelulares secretados pelas CEM. O objetivo deste estudo foi avaliar comparativamente, em abordagens in vitro, a ação do meio condicionado das células estromais mesenquimais derivadas da derme (CEM-d) e do tecido adiposo (CEM-ta) humanos no reparo tecidual cutâneo. Para isto, o mc-CEM-d e o mc-CEM-ta foram avaliados quanto ao potencial de promover a proliferação e a migração de queratinócitos e fibroblastos, e de estimular a formação de tubos por células endoteliais. Os resultados obtidos mostram que o mc-CEM-d foi mais eficiente que o mc-CEM-ta em estimular a migração de queratinócitos e fibroblastos em ensaios de fechamento de lesão (cell scratch) e em promover a formação de tubos por células endoteliais. Já o mc-CEM-ta foi mais eficiente em promover a proliferação de queratinócitos e fibroblastos. Desta forma, foi possível verificar que o meio condicionado das diferentes fontes de CEM analisadas possuem propriedades biológicas semelhantes com algumas características distintas no potencial terapêutico de reparo em lesões cutâneas.Abstract : Mesenchymal stromal cells (MSC) are multipotent cells found in various tissues of the human body. The facility of obtaining and isolating, high capacity of propagation in culture and of migrating to sites of injury facilitates the use of these cells for possible therapeutic applications. The MSC are involved in the process of tissue repair mainly in a paracrine way, that is, by the secretion of soluble factors. For this reason, several studies suggest that MSC can be replaced by its conditioned medium (cm), which contains soluble factors and extracellular vesicles secreted by MSC. The objective of this study was to compare the action of conditioned medium of dermal-derived mesenchymal stromal cells (DSC) and human adipose tissue (ASC) on cutaneous tissue repair in vitro approaches. For this cmDSC and cmASC were evaluated for potential to promote the proliferation and migration of keratinocytes and fibroblasts, and to stimulate the formation of endothelial cell tubes. The results obtained show that cmDSC was more efficient than cmASC in stimulating the migration of keratinocytes and fibroblasts in scratch assays and in promoting tube formation by endothelial cells. On the other hand, cmASC was more efficient at promoting the proliferation of keratinocytes and fibroblasts. In this way, it was possible to verify that the conditioned medium of the different sources of MSC analyzed have similar biological properties with some distinct characteristics in the therapeutic potential of repair in cutaneous lesions