Padronização da amplificação e análise de genes envolvidos no metabolismo de ácidos micólicos em estirpes de Mycobacterium tuberculosis

TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências da Saúde. Farmácia.A tuberculose (TB) é uma doença infectocontagiosa que constitui um problema de saúde global, sendo considerada a nona maior causa de morte em todo o mundo. Mycobacterium tuberculosis é o principal agente causador de TB em humanos e seu envelope celular contém um alto teor lipídico, possuindo ácidos micólicos (AMs) como um dos principais componentes. M. tuberculosis produz três classes principais de AMs – alfa, metóxi e ceto-micolatos. Os AMs estão associados à virulência de M. tuberculosis, conferindo resistência à dessecação e à descoloração por álcool e ácido, resistência à lesão química e ao sistema imune do hospedeiro, bem como possuem capacidade de persistir e se multiplicar dentro do ambiente hostil do fagolisossoma dos macrófagos. Os genes envolvidos no metabolismo de AMs podem sofrer deleções ou mutações, fazendo com que o envelope celular apresente diferenças na composição lipídica. Estas diferenças na composição lipídica podem interferir na sensibilidade aos antimicrobianos e contribuir para diferenças na resposta imunológica do hospedeiro. Estirpes de M. tuberculosis apresentam uma diversidade genética e estudos demonstraram diferenças significativas nas proporções de AMs pertencentes a mesma linhagem filogenética. O objetivo deste estudo foi padronizar reações de PCR para amplificação de genes envolvidos no metabolismo de AMs e realizar uma análise inicial intralinhagem, sendo que os genes sequenciados (mmaA2, mmaA4 e kasB) de isolados pertencentes à família LAM não apresentaram nenhuma mutação significativa. Sendo assim, torna-se importante a utilização de abordagens genômicas e lipidômicas em conjunto para auxiliar na caracterização de estirpes de M. tuberculosis que apresentam diferentes perfis clínicos