Efeito da ativação dos receptores D3/D2 dopaminérgicos no modelo experimental de fibromialgia induzido pela reserpina em camundongos

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Araranguá, 2020.Introdução: A fibromialgia (FM) é um distúrbio musculoesquelético complexo caracterizado por dor crônica generalizada acompanhada de sintomas somáticos e emocionais, incluindo distúrbios do sono, fadiga, ansiedade e depressão. Embora a etiologia da FM ainda seja desconhecida, a diminuição significativa das aminas biogênicas, ou seja, dopamina, norepinefrina e serotonina são características comuns em sua patogênese. Evidências anteriores sugerem que a dopamina está profundamente envolvida no controle da dor. Além disso, as terapias farmacológicas atuais têm um papel limitado e os benefícios clínicos não são satisfatórios, portanto, a modulação do sistema inibitório descendente pode produzir efeito analgésico durante a progressão da FM. Objetivo: O presente estudo objetivou investigar o efeito antinociceptivo do pramipexol (PPX) ? agonista do receptor D3/D2 dopaminérgico ? no modelo experimental de FM induzido por reserpina em camundongos. Métodos: O modelo experimental de FM foi induzido por injeção subcutânea (s.c.) de reserpina (0,25 mg/kg) uma vez ao dia por 3 dias consecutivos em camundongos Swiss fêmeas. Os animais foram tratados com PPX (0,1, 1 e 5 mg/kg, i.p.), uma vez ao dia, do dia 4 ao dia 14 (tratamento terapêutico) ou com 1 mg/kg do dia 0 ao dia 4 (tratamento preditivo). Posteriormente, os animais foram eutanasiados, e os tecidos cerebrais (córtex pré-frontal e medula espinhal) foram coletados para análises bioquímicas e moleculares. Resultados: O tratamento terapêutico com PPX inibiu significativamente a alodínia mecânica e sensibilidade térmica induzida pela reserpina. Relevantemente, o PPX reduziu o tempo de imobilidade no teste de nado forçado e aumentou o número de grooming (comportamento de autolimpeza) no teste de borrifagem de solução de sacarose, respectivamente. No teste de labirinto em cruz elevado, os animais que receberam PPX 1 mg/kg permaneceram maior tempo nos braços abertos, em comparação com o grupo reserpina. A administração repetida de PPX (1 mg/kg, i.p), administrada diariamente, durante 4 dias, bloqueou significativamente a alodínia mecânica induzida pela reserpina, com inibição semelhante àquela observada nos animais tratados com pregabalina (30 mg/kg, v.o), usada como controle positivo, muito embora não tenha alterado significativamente a nocicepção térmica induzida por reserpina. Ainda, foi possível observar que o tratamento com PPX reestabeleceu os níveis diminuídos de dopamina na medula espinhal e córtex pré-frontal quando comparado aos animais controles não tratados. Conclusão: Em conjunto, os resultados do presente trabalho demonstram que o agonista preferencial do receptor D3/D2 reduziu os sintomas clínicos induzidos pelo modelo experimental de FM, incluindo a hiperalgesia, comportamento tipo depressivo e ansiogênico. O efeito do PPX ocorreu, em parte, pelo restabelecimento dos níveis das monoaminas, particularmente dopamina, na região infraespinhal.Abstract: Introduction: Fibromyalgia (FM) is a complex musculoskeletal disorder characterized by widespread chronic pain accompanied by somatic and emotional symptoms, including sleep disorders, fatigue, anxiety and depression. Although the etiology of FM is still unknown, significant decrease in biogenic amines, i.e., dopamine, norepinephrine, and serotonin are common characteristics in its pathogenesis. Previous evidence suggests that dopamine is deeply involved in pain control. Moreover, current pharmacological therapies have a limited role and proper clinical benefits are far from satisfactory, thus modulation of descending inhibitory system may produce analgesic effect during FM progression. Aim: The present study investigated the antinociceptive effect of pramipexole (PPX) ? dopaminergic D3/D2 receptor agonist ? in the reserpine-induced experimental FM model in mice. Methods: FM model was induced with a subcutaneous (s.c.) injection of reserpine (0.25 mg/kg) once daily for 3 consecutive days in female Swiss mice. Animals were treated with PPX (0.1, 1 and 5 mg/kg, i.p.), once a day, from day 4 to day 14 (therapeutic treatment) or with 1 mg/kg from day 0 to day 4 (predictive treatment). Subsequently, the animals were euthanized, and brain tissues (prefrontal cortex and spinal cord) were collected for biochemical and molecular analyzes. Results: Therapeutic treatment with PPX inhibited reserpine-induced mechanical allodynia and thermal sensitivity. Relevantly, PPX treatment decreased immobility time and increased number of grooming (self-cleaning behavior) in the forced swimming test and splash test, respectively. In the elevated plus-maze test, animals that received PPX 1 mg/kg remained longer in the open arms, as compared to the reserpine group. The repeated PPX administration (1 mg/kg, i.p.), given daily, during 4 days, significantly blocked the mechanical allodynia induced by reserpine, similarly to pregabalin (30 mg/kg, p.o.) used as positive control, although it failed to significantly affect the reserpine-induced thermal nociception. Still, it was possible to observe that the treatment with PPX reestablished dopamine levels in the spinal cord and prefrontal cortex. Conclusion: Altogether, the results of the present study demonstrated that the preferential agonist of the D3/D2 receptor reduced the clinical symptoms induced by the experimental model of FM, including hyperalgesia, depressive and anxiogenic behavior. The effect of PPX occurred, in part, by the increase in the levels of monoamines, particularly dopamine, in the infraspinatus region