Análise da permeabilidade intestinal através da dosagem sérica de zonulina e sua relação com escores de atividade clínica e marcadores inflamatórios em pacientes com doença inflamatória intestinal

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2021.Introdução: A doença inflamatória intestinal (DII) compreende o espectro entre a doença de Crohn (DC) e a colite ulcerativa (UC), condição cuja prevalência em países como o Brasil vem aumentando significativamente nos últimos anos. A fisiopatologia da DII não está totalmente conhecida, mas sabidamente o processo inflamatório crônico associa-se a uma resposta imunológica inadequada e ocorre, sobretudo, em indivíduos geneticamente predispostos sob um contexto ambiental favorável ao desenvolvimento dessa condição. Alterações na função de barreira do epitélio intestinal e, consequentemente, um aumento da permeabilidade intestinal, têm sido citados como fatores importantes na patogênese de diferentes condições autoimunes, entre elas, a DII. Objetivos: Estudar as concentrações séricas da zonulina em pacientes portadores de DII e a sua relação com índices clínicos de atividade da doença e marcadores inflamatórios circulantes. Métodos: Estudo observacional transversal que incluiu 117 pacientes com DII e 32 indivíduos que compuseram o grupo controle. Foram coletados dados epidemiológicos e clínicos dos pacientes com DII e aplicados escores de atividade clínica. Do ponto de vista laboratorial, todos os indivíduos foram submetidos à coleta de sangue periférico para realização de exames usuais e para determinação das concentrações de proteína C reativa (PCR), zonulina e de citocinas inflamatórias. Resultados: Dentre os pacientes com DII, a média de idade foi de 44,0 ± 15,9 anos, com uma predominância do sexo feminino (66,7%). Em relação ao diagnóstico estabelecido, 60 (51,3%) pacientes eram portadores de DC; apenas 16,2% dos pacientes já haviam sido submetidos a intervenções cirúrgicas relacionadas à DII. No momento da avaliação clínico-laboratorial, 56,7% dos pacientes com DC encontravam-se em remissão clínica e, dentre os pacientes com UC, 59,2% deles assim se encontravam. Não foram observadas diferenças estatísticas na concentração sérica da zonulina entre pacientes com DII (95,28 ng/mL) e indivíduos do grupo controle (96,61 ng/mL; p = 0,573). Dentre os pacientes com DII, as concentrações da zonulina foram estatisticamente mais elevadas no sexo feminino e correlacionaram-se positivamente com o índice de massa corporal (IMC). Nos pacientes com DC, as concentrações da zonulina não se correlacionaram com o índice de atividade da doença, mas, dentre os pacientes com UC, a concentração da zonulina correlacionou-se positivamente com o índice de atividade da doença (p = 0,041). Em relação às citocinas inflamatórias, não foram observadas diferenças estatisticamente significativas em relação às concentrações entre pacientes com DII e o grupo controle. As concentrações da zonulina não se correlacionaram às das citocinas circulantes entre os pacientes com DII. Dentre os pacientes com DII, aqueles que apresentaram história de internação hospitalar prévia relacionada a essa condição demonstraram concentrações séricas de IFN-? e IL-17A estatisticamente mais elevadas do que pacientes sem esse antecedente (p = 0,030 e p = 0,024, respectivamente). Conclusões: Neste estudo, que incluiu majoritariamente pacientes com DII bem controlada, a concentração sérica da zonulina e de diferentes citocinas inflamatórias não diferiu entre pacientes com DII e indivíduos sem essa condição. Observaram-se concentrações mais elevadas da zonulina em pacientes do sexo feminino e em pacientes com valores mais elevados de IMC. A concentração sérica da zonulina relacionou-se com a atividade clínica na UC, mas não na DC.Abstract: Introduction: Inflammatory bowel disease (IBD) comprises the spectrum between Crohn's disease (CD) and ulcerative colitis (UC), a condition whose prevalence in countries such as Brazil has increased significantly in recent years. The pathophysiology of IBD is not fully understood, but it is known that the chronic inflammatory process is associated with an inadequate immune response and occurs, mainly, in genetically predisposed individuals under a favorable environmental context to the development of this condition. Changes in the intestinal epithelial barrier function and, consequently, an increase in intestinal permeability, have been suggested as important factors in the pathogenesis of different autoimmune conditions, including IBD. Objectives: To study serum zonulin concentrations in patients with IBD and their relationship with clinical indices of disease activity and circulating inflammatory markers. Methods: This was a cross-sectional observational study that included 117 patients with IBD and 32 individuals who made up the control group. Epidemiological and clinical data were collected from patients with IBD and clinical activity scores were applied. All subjects underwent peripheral blood collection to perform the usual tests and to determine the concentrations of C-reactive protein (CRP), zonulin and inflammatory cytokines. Results: Among patients with IBD, the mean age was 44.0 ± 15.9 years, with a predominance of female gender (66.7%). Regarding the established diagnosis, 60 (51.3%) patients had CD; only 16.2% of patients had already undergone surgical interventions related to IBD. At the time of clinical and laboratory evaluation, 56.7% of patients with CD were in clinical remission and, among patients with CU, 59.2% of them presented with this clinical status. There were no statistical differences in serum zonulin concentrations between patients with IBD (95.28 ng/mL) and the control group (96.61 ng/mL; p = 0.573). Among patients with IBD, zonulin concentrations were statistical higher in females and correlated positively with body mass index (BMI). In patients with CD, zonulin concentrations did not correlate with disease activity index, but among patients with UC, zonulin concentrations correlated positively with disease activity index (p = 0.041). Regarding inflammatory cytokines, we did not observe a statistically significant difference in relation to these concentrations between patients with IBD and the control group. Zonulin concentrations did not correlate with circulating cytokines among IBD patients. Among patients with IBD, those who had a history of hospital admission related to this condition demonstrated statistical higher serum concentrations of IFN-? and IL-17A than patients without this history (p = 0.030 and p = 0.024, respectively). Conclusions: In this study, which mostly included patients with well-controlled IBD, the serum concentration of zonulin and different inflammatory cytokines did not differ between patients with IBD and individuals without this condition. Higher concentrations of zonulin were observed in female patients and in patients with higher BMI values. The serum concentration of zonulin was related to clinical activity in UC, but not in CD