Caracterização da cefaleia pós-traumática em um modelo experimental de traumatismo cranioencefálico: papel das fibras sensíveis à capsaicina

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2018.Em todo o mundo, o traumatismo cranioencefálico (TCE)é uma das principais causas de incapacidade, incluindo déficitsmotores, cognitivos, comportamentais, cefaleia e dorgeneralizada. Embora alguns estudos pré-clínicos tenhamdemonstrado os efeitos do TCE na cefaleia, algumas questõessobre o melhor grupo controle para esta avaliação e asadaptações moleculares que acarretam este distúrbio após oTCE são pouco compreendidas. Assim, este estudo teve comoum dos objetivos demonstrar os efeitos de cada etapa doprocedimento cirúrgico no modelo de lesão por percussão defluido (FPI) em ratos sobre a alodinia periorbital, um componenteassociado à cefaleia. A alodinia periorbital foi avaliada utilizandofilamentos de von Frey pelo método up and down . Os gruposnaive, incisão, raspagem, craniectomia e TCE foram criados eavaliados em 1, 3, 7, 14, 21, 28, 35, 45 e 60 dias em ambos oslados da cabeça. Concomitantemente, os grupos naive,craniectomia e TCE foram submetidos à avaliação dahiperalgesia das patas traseiras ao longo do tempo (7, 28, 35, 45e 60 dias) após a lesão. O procedimento cirúrgico diminuiu oslimiares para os filamentos de von Frey após vinte e quatro horasem todos os grupos quando comparado ao grupo naive(p<0,0001). Os grupos raspagem, craniectomia e TCE mostraramuma diminuição no limiar mecânico periorbital por 35 dias emcomparação com os grupos naive e incisão (p<0,0001). Apenas ogrupo TCE demonstrou uma diferença significativa na alodiniaperiorbital em 45 e 60 dias após a lesão (p<0,01). A diminuiçãoda latência de retirada da pata traseira contralateral à lesão foiobservada no grupo TCE em comparação com o grupo naive em7 dias e 28 dias após a lesão (p<0,05). Além disso, em outroobjetivo, este estudo verificou o efeito das fibras que contém ocanal TRPV1 na alodinia periorbital e na inflamação trigeminalapós o TCE em ratos através da depleção destas fibras induzidapela capsaicina, bem como o efeito do canal TRPV1 na alodiniaperiorbital através da administração de antagonistas do tiposeletivo (capsazepina) e não seletivo (vermelho de rutênio) destecanal. Para isso, a avaliação foi realizada até 7 dias após o TCEe as análises bioquímicas para o imunoconteúdo de GFAP e IBA-1 no gânglio trigeminal, tronco encefálico e córtex forammensuradas em 8 dias. O TCE induziu uma diminuição noslimiares para alodinia periorbital e a depleção de fibras reverteuesse valor quando avaliado em 7 dias após a lesão (p<0,05). OTCE também induziu um aumento da inflamação no gângliotrigeminal, no tronco encefálico e córtex dos animais (p<0,05). Asadaptações moleculares induzidas pela depleção de fibrascontendo o canal TRPV1 protegeram contra o aumento daresposta inflamatória do sistema trigeminal (p<0,05). Além disso,a abordagem farmacológica mostrou que o agonista dosreceptores serotoninérgicos, bem como o antagonista seletivo enão seletivo do canal TRPV1 exerceram uma proteção contra adiminuição dos limiares de alodinia periorbital induzida pelo TCE(p<0,05). No entanto, o antagonista seletivo do canal TRPV1demonstrou um melhor efeito nesta inibição. Os dados indicamque cada passo do procedimento cirúrgico é capaz de causaralodinia periorbital no modelo de TCE por FPI, e que as fibrasque contém o canal TRPV1, bem como o canal TRPV1, estãodiretamente envolvidos nesta sensibilização. Assim, o modelo deFPI é relevante para o estudo da cefaleia e dor generalizada nasfases aguda e crônica após uma lesão. Além disso, os resultadosapresentados neste trabalho suportam a ideia que asensibilização avaliada pela alodinia periorbital em ratos após oTCE é conduzida pela interação entre a resposta inflamatórianeurogênica e clássica, mediada pelas fibras nociceptivas quecontém o canal TRPV1.Abstract : Throughout the world, traumatic brain injury (TBI) is one ofthe major causes of disability, including deficits motor, cognitive,behavioral, headache and generalized painful. Although somepreclinical studies have demonstrated the effects of TBI on theheadache, some questions about the better control group to thisevaluation and the molecular adaptations that involve thisdisorder after TBI are poorly understood. Thus, these study hadan objective demonstrated the effects of each step of the surgicalprocedure in fluid percussion injury (FPI) model in rats onperiorbital allodynia, a component associate with the headache.Periorbital allodynia was evaluated using von Frey filaments by up and down method. Naive, incision, scraping, craniectomyand TBI groups were created and evaluated in 1, 3, 7, 14, 21, 28,35, 45 and 60 days in both sides of head. Concomitantly, naive,craniectomy and TBI groups underwent assessments of hindpawhyperalgesia over time (7, 28, 35, 45 and 60 days) after thelesion. Surgical procedure decreased von Frey filamentsthresholds after twenty-four hours in all groups when compared tothe naive group (p<0.0001). Scraping, craniectomy and TBIgroups showed a decrease in the periorbital mechanical thresholdfor 35 days compared with the naive and incision groups(p<0.0001). Only the TBI group demonstrated a significantdifference in periorbital allodynia at 45 and 60 days after theinjury (p<0.01). A decrease in the thermal withdrawal latency ofthe hindpaw contralateral to the lesion was observed in the TBIgroup compared with the naive group at 7 days and 28 days afterthe lesion (p<0.05). Moreover, in other objective, this study verifythe effect of TRPV1-containing fibers at periorbital allodynia andtrigeminal inflammation after TBI in rats through of the capsaicininducedepletion these fibers, as well the effect of TRPV1 channelon the periorbital allodynia through of administration of selective(capsazepine) and non-selective (ruthenium red) antagonists thischannel. For this, the evaluation was realized until 7 days afterTBI and the biochemical analyses to GFAP and IBA-1 immunecontent of the ganglion trigeminal, brainstem and cortex weremeasured in 8 days. TBI induced a decrease in periorbitalallodynia thresholds and depletion of fibers reverted this valuewhen evaluated in 7 days after the lesion (p<0.05). TBI inducedan increase of the inflammation in ganglion trigeminal brainstemand cortex of the rats. The molecular adaptations elicited bydepletion of TRPV1-containing fibers protected against theincrease at the inflammatory response of trigeminal system(p<0.05). Moreover, the pharmacological approach showed thatagonist of serotoninergic receptors, as well the TRPV1 selectiveand non-selective antagonists as protect against decrease on theperiorbital allodynia thresholds induced by TBI (p