Influência do óxido nítrico e de fatores endoteliais sobre a reatividade da aorta de ratos para vasoconstritores

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2022.A interação entre as células endoteliais e as células do músculo liso vascular desempenha um papel importante na regulação da homeostase cardiovascular. As células endoteliais possuem função de modular a ação de substâncias vasoativas produzidas localmente ou circulantes, metabolizar e inativar substâncias vasopressoras, por meio da liberação de suas substâncias vasodilatadoras, como NO, PGI2 e EDHF, e vasoconstritores, como os EROs, os prostanóides derivados da via COX e os vasoativos (endotelina-1 e angiotensina II). No entanto, como os fatores endoteliais influenciam a reatividade arterial gerada por diferentes vasoconstritores ainda precisa ser explorado. Sendo assim, o objetivo do trabalho foi avaliar a influência dos fatores endoteliais sobre respostas contráteis induzidas por diferentes ligantes na aorta de ratos. Os resultados demostram que após a remoção do endotélio, o Emax (efeito contrátil máximo) aumentou de forma mais intensa para angiotensina II, ao comparar com o Emax da vasopressina, noradrenalina e fenilefrina, mas não aumentou o Emax da adrenalina. O bloqueio do NO endógeno (L-NAME) também aumentou intensamente o Emax da angiotensina II, ao comparar com o Emax da vasopressina e fenilefrina. Observamos também que nas preparações sem endotélio funcional, apenas o Emax da angiotensina II foi reduzido após pré-incubação com 1 nM de SNP, e o Emax da adrenalina só reduziu na presença de 30 nM de SNP. Confirmando nossos achados, a NTG (100 nM) também foi capaz de reduzir o Emax dos agonistas testados, com exceção da adrenalina. Já nas preparações com endotélio funcional, o Emax dos vasoconstritores avaliados foi menor apenas após a pré-incubação com 30 nM de SNP. De forma diferente, a pré-incubação com NTG reduziu apenas o Emax da fenilefrina e noradrenalina. Os dados do presente estudo demostram que assim como a indometacina, a pré-incubação com apocinina não foi capaz de reduzir o Emax dos vasoconstritores avaliados nas preparações com endotélio funcional. Por outro lado, a pré-incubação com tempol foi capaz de reduzir o Emax da angiotensina II nas preparações com endotélio. Estes resultados indicam que, dependendo do vasoconstritor utilizado, o NO e o ânion superóxido produzidos pelas células endoteliais, podem modular as respostas contrateis de maneira diferenciada.Abstract: The interaction between endothelial cells and vascular smooth muscle cells plays an important role in the regulation of cardiovascular homeostasis. Endothelial cells have the function of modulating the action of locally produced or circulating vasoactive substances, metabolize and inactivate vasopressor substances, through the release of their vasodilating substances, such as NO, PGI2 and EDHF, and vasoconstrictors, such as ROS, prostanoids derived from the COX pathway and vasoactive agents (endothelin-1 and angiotensin II). However, how endothelial factors influence arterial reactivity to different vasoconstrictors remains to be explored. Therefore, the aim of this study was to evaluate the influence of endothelial factors on contractile responses induced by different ligands in rat aortic rings. The results demonstrated that after removal of the endothelium, the Emax increased intensely for angiotensin II, compared to Emax from vasopressin, norepinephrine and phenylephrine, but did not increase the Emax for epinephrine. Blockade of endogenous NO (L-NAME) was able to increase more the Emax of angiotensin II than to the Emax induced by vasopressin and phenylephrine. We also observed that in preparations without functional endothelium, only the Emax of angiotensin II was reduced by pre-incubation with 1 nM SNP, and the Emax of epinephrine only decreased after pre-incubation with 30 nM SNP. Reinforcing our findings, NTG (100 nM) was also able to reduce the Emax of the tested agonists, with the exception of epinephrine. In preparations with functional endothelium, the Emax of the vasoconstrictors was reduced only by 30 nM SNP. Differently, after incubation with NTG, only the Emax of phenylephrine and norepinephrine. The data from the present study demonstrated that as indomethacin, pre-incubation with apocynin was not able to reduce the Emax of the vasoconstrictors evaluated in preparations with functional endothelium. On the other hand, pre-incubation with tempol was able to reduce the Emax of angiotensin II in preparations with endothelium. These results indicate that depending on the vasoconstrictor used, NO and superoxide anion produced by endothelial cells can modulate contractile responses in a differentiated manner