IS6110-RFLP e spoligotyping di ceppi di Mycobacterium tuberculosis isolati in Toscana nel 2002

La recente scoperta di elementi trasponibili in Mycobacterium tuberculosis, in particolare la sequenza di inserzione IS6110, ha consentito l'allestimento di un metodo di tipizzazione molecolare basato sul polimorfismo della lunghezza dei frammenti di restrizione IS6110-specifici (IS6110-RFLP), che rappresenta la base per lo studio dell’epidemiologia molecolare della tubercolosi (TB). Nel presente lavoro si riporta la tipizzazione IS6110-RFLP di 249 ceppi di M. tuberculosis complex, isolati da altrettanti pazienti, che rappresentano pressoché la totalità degli isolati in Toscana nel corso dell’anno 2002. L’analisi IS6110-RFLP ha consentito di individuare 225 profili di bandeggio unici e 56 ceppi (22.5%) che si presentavano in clusters di pochi elementi identici. In particolare, 19 clusters erano costituiti da 2 ceppi, 3 clusters da 3 ceppi, 1 cluster da 4 ceppi ed 1 cluster da 5 ceppi identici. Siccome si ritiene che i clusters comprendano i ceppi implicati in infezioni tubercolari di recente acquisizione, se ne deduce che in Toscana la trasmissione della TB è comparabile a quella dei Paesi a bassa incidenza di TB, anche se sono da segnalare sporadici episodi di microfocolai epidemici. I ceppi sono stati inoltre sottoposti ad analisi “Spoligotyping”, una tecnica molecolare basata sul polimorfismo delle regioni spaziatrici (spacers) del locus DR (Direct Repeats) di M. tuberculosis che, sebbene dotata di un minor potere discriminativo rispetto alla tipizzazione IS6110-RFLP, consente l’individuazione dei ceppi della famiglia denominata Beijing o W, i cui membri stanno destando allarme a livello mondiale per le potenzialità di rapida diffusione, di maggior virulenza e di acquisizione di farmaco-resistenza multipla. L’analisi Spoligotyping dei 249 ceppi ha individuato 7 ceppi di genotipo Beijing/W, 5 dei quali isolati da pazienti immigrati, dimostrando così per la prima volta la loro presenza e diffusione anche in Italia. I 7 ceppi Beijing/W isolati in Toscana nel 2002 si sono rivelati comunque suscettibili ai farmaci anti-tubercolari di prima scelta