Identificazione di un gene di Mycobacterium tuberculosis richiesto per la replicazione nel fegato di topi BALB/c

Il gene fadD33 di Mycobacterium tuberculosis codifica per una acil-CoA sintetasi, un enzima coinvolto nel metabolismo lipidico. Il gene è sottoespresso nel ceppo attenuato H37Ra rispetto al ceppo virulento H37Rv (BBRC 258:94-101,1999). Allo scopo di valutare l'eventuale ruolo del gene fadD33 nella virulenza di M. tuberculosis, il gene è stato clonato ed espresso in M. tuberculosis H37Ra ed il ceppo complementato M. tuberculosis H37Ra-fadD33 è stato inoculato per via endovenosa in topi Balb/c. Non sono state trovate differenze significative nel numero delle unità formanti colonia (CFU) di M. tuberculosis H37Ra-fadD33, M. tuberculosis H37Rv e M. tuberculosis H37Ra nella milza e nei polmoni degli animali infetti. Nel fegato, invece, il numero delle CFU di M. tuberculosis H37Ra-fadD33 è risultato significativamente superiore a quello del ceppo attenuato H37Ra e non diverso dal ceppo virulento H37Rv, indicando quindi che la complementazione di H37Ra con fadD33 ripristinava il fenotipo virulento. In un ulteriore approccio, il gene fadD33 di M. tuberculosis H37Rv è stato inattivato mediante mutagenesi per scambio allelico (gene knock-out) e la virulenza del mutante è stata saggiata mediante infezione sperimentale nel topo. A 14, 42 e 123 giorni di infezione, il numero delle CFU del mutante knock-out risultava significativamente inferiore a quello del ceppo parentale H37Rv nel fegato, ma non nella milza e nei polmoni; inoltre, la complementazione del mutante knock-out con fadD33 ripristinava il fenotipo virulento nel fegato, ma non influenzava la replicazione batterica nei polmoni e nella milza. Tali risultati suggeriscono quindi che il gene fadD33 svolge un ruolo nella virulenza di M. tuberculosis determinando la moltiplicazione tessuto-specifica nel fegato