Comparative analysis of Candida spp. isolated from complete denture wearers with and without HIV diagnosis

A estomatite protética é uma inflamação da mucosa do tecido de suporte de próteses totais, tem um de seus fatores a colonização por Candida spp. O objetivo deste estudo foi avaliar a prevalência, virulência e morfologia de cepas de Candida spp. isoladas de biofilmes de pacientes usuários de próteses totais com estomatite relacionado a prótese (ERP), com e sem o diagnóstico de HIV. Cinquenta e cinco usuários de próteses totais com diagnóstico de ERP foram distribuídos em dois grupos: Experimental - com diagnóstico de infecção pelo vírus HIV e Controle. O biofilme foi coletado por meio do método padronizado de ultrassonificação das próteses. A prevalência foi avaliada por meio de identificação pelo método cromógeno CHROMagar Candida e confirmação de isolados pela reação de cadeia da polimerase (PCR). Os fatores de virulência foram mensurados por meio da capacidade de formação de biofilme pela contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL), do metabolismo celular pela metabolização do sal tetrazolio e da produção de proteinase e fosfolipase por kit fluorimétrico. A morfologia foi verificada por meio do teste indutor de hifas. A idade, grau de ERP, carga viral e contagem de linfócitos T-CD4+ foram coletados por formulário e, para o grupo experimental, foi avaliada a correlação entre a capacidade de formação do biofilme e ERP, carga viral e contagem de T-CD4; bem como a relação entre ERP e carga viral e contagem de linfócitos T-CD4+. Os fatores de virulência e morfologia foram comparados pelo teste t de Student, com exceção da produção de fosfolipase (C. albicans) e proteinase (não-albicans), os quais foram comparados pelo teste U de Mann-Whitney. Para a avaliação da idade, grau de ERP, carga viral e contagem de linfócitos T-CD4+, foram empregados o teste de Spearman e exato de Fisher. Foi utilizado nível de significância de 5% (α = 0,05). Os resultados da prevalência mostraram, dos 55 pacientes (22 experimental e 33 controle), um total de 63 amostras de Candida spp. isoladas, sendo 28 cepas de C. albicans e 36 cepas não albicans. Não houve diferença significante entre os grupos quanto à contagem de UFC/mL em baseline, à capacidade de formação do biofilme, ao metabolismo celular e à produção de fosfolipase; e houve maior produção de proteinase para C. albicans no controle (p=0,031) e para não-albicans no experimental (p=0,016). Quanto à morfologia, não houve diferença significante entre os grupos (Controle e experimental) (C. albicans - p=0,860; não-albicans - p=0,501). Quanto a carga viral, para o grupo experimental, foi indetectável em 13 pacientes (59%), a contagem de células T-CD4+ foi em média de 565 células por mm3, houve correlação negativa moderada entre a contagem de UFC/mL em baseline de não-albicans e ERP (ρ= -0,592, p=0,020) e não houve relação entre ERP e carga viral (p=0,1772), bem como entre ERP e T-CD4+ (p=0,3624). Concluiu-se que a C. albicans foi a espécie mais isolada, que não houve diferença quanto às cepas de Candida spp. de usuários de próteses totais com ERP com e sem o diagnóstico de HIV para os fatores de virulência (exceto para produção de proteinase) e morfologia.Denture-related stomatitis (DRS) is an inflammation of the mucosa of the supporting tissue of complete dentures, frequent in HIV+ individuals, that of main factors is the colonization by Candida spp. The aim of this study was to evaluate the prevalence, virulence and morphology of Candida spp. isolated from biofilms of complete denture wearers with denture-related stomatitis with and without HIV diagnosis. Fifty-five users of complete dentures diagnosed with DRS were divided in two groups: Experimental (HIV+) and Control (HIV-). Biofilm was collected using a standardized method of ultrasonification of prostheses. The prevalence was evaluated through identification by the chromogenic method CHROMagar Candida, and confirmation of isolates by polymerase chain reaction (PCR). Virulence factors were measured by the biofilm formation capacity by counting colony-forming units (CFU/mL), biofilm metabolism by tetrazolium salt metabolization, and the proteinase and phospholipase production by a fluorimetric kit. Morphology was verified using the hyphae inducing test. Health data were collected using a form and, for the experimental group, the correlation between the ability to form biofilm with DRS, viral load and CD4+T cells count were evaluated; as well as the relationship between DRS with viral load and CD4+T lymphocyte count. Virulence and morphology factors were compared by Student\'s T test, except for phospholipase (C. albicans) and proteinase (non-albicans) production, which were compared by Mann-Whitney U test. For health data, Spearman\'s and Fisher\'s exact tests were used. A significance level of 5% (α = 0.05) was used. The prevalence results included 55 patients (22 experimental and 33 control), a total of 63 samples of Candida spp. isolated, being 28 strains of Candida albicans and 36 non-albicans strains. There was no significant difference between groups regarding baseline CFU/mL count, biofilm formation capacity, cell metabolism and phospholipase production. There was a higher production of proteinase for C. albicans in the control (p=0.031) and for non-albicans in the experimental (p=0.016). Regarding the morphology, there was no significant difference between the groups (Control and experimental) (C. albicans - p=0.860; non-albicans - p=0.501). As for health data, for the experimental group, viral load was undetectable in 13 patients (59%), the CD4+T count had a mean of 565 cells per mm3 , there was a moderate negative correlation between the CFU count/mL in baseline for non-albicans and DRS classification (ρ= -0.592, p=0.020) and there was no relationship between DRS and viral load (p=0.1772), as well as between DRS and CD4+ T count (p=0.3624). It was concluded that C. albicans was the most isolated species, that there was no difference regarding Candida spp. from complete denture wearers with ERP, with and without HIV diagnosis for virulence factors (except for proteinase production) and morphology