Evaluation of antigenic proteins and metabolomic analysis of the pathogen Legionella pneumophila

Η Legionella είναι ένα γένος παθογόνων Gram-αρνητικών, υποχρεωτικά αερόβιων βακτηρίων. Το είδος L. pneumophila, προκαλεί τη νόσο των Λεγεωνάριων ή λεγιονέλλωση, η οποία παρουσιάζεται κλινικά με τη μορφή δύο συνδρόμων: μίας οξείας βακτηριακής λοίμωξης του αναπνευστικού, που εκδηλώνεται κυρίως με πνευμονία και του πυρετού Pontiac, μια ίωση του αναπνευστικού που μοιάζει με γρίπη. Στην εργασία, πρωτεΐνες του βακτηρίου L.pneumophila, απομονωθήκαν μετά από ετερόλογη έκφραση σε E. Coli. Οι πρωτεΐνες αξιολογήθηκαν ως προς την αντιγονικότητά τους με ορούς ασθενών αλλά και υγιών ατόμων. Με γνώμονα την αντιγονικότητα επιλέχθηκε η dihydrolipoamide succinyltransferase (lpg_0533) για την δημιουργία ενός διαγνωστικού τεστ, που λειτουργεί βάσει της φασματοσκοπίας ηλεκτροχημικής εμπέδησης. Επιπλέον, έγινε μεταβολομική ανάλυση με φασματοσκοπία μαγνητικού πυρηνικού συντονισμού σε εκχύλισμα βακτηριακών κυττάρων από καλλιέργειες του βακτηρίου, για να μελετηθούν οι μεταβολίτες στα διάφορα στάδια της ανάπτυξης του παθογόνου.Legionella is a genus of pathogenic Gram-negative, obligate aerobic bacteria. The species L. pneumophila causes Legionnaires' disease or legionellosis, which presents clinically in the form of two syndromes: an acute bacterial respiratory infection, manifested mainly by pneumonia, and Pontiac fever, a respiratory virus similar to influenza. In the work, proteins of the bacterium L.pneumophila were isolated after heterologous expression in E. Coli. The proteins were evaluated for their antigenicity with sera from patients and healthy individuals. Based on antigenicity, dihydrolipoamide succinyltransferase (lpg_0533) was chosen for the creation of a diagnostic test, which works on the basis of electrochemical impedance spectroscopy. In addition, metabolomic analysis by nuclear magnetic resonance spectroscopy was performed on bacterial cell extract from cultures of the bacterium, to study the metabolites in the different stages of the pathogen's development