TRANSIENT EXPRESSION OF \u3b2-GLUCURONIDASE IN RECALCITRANT UGANDAN SWEETPOTATO AND PUTATIVE TRANSFORMATION WITH TWO CRY GENES

Sweetpotato ( Ipomoea batatas Lam.) has high potential to contain hunger, malnutrition and poverty in sub-Saharan Africa (SSA), since it gives early yield with few inputs. However, productivity of the crop in Africa is very low due to various challenges, such as severe viral diseases and increasing attacks by sweetpotato weevils, Cylas puncticollis and C. brunneus . Effective resistance to weevils has not been identified in the sweetpotato gene pool. On the other hand, the weevil-resistance genes, cry7Aa1 and cry3Ca1 were assembled into a plasmid vector for use in genetic transformation of African sweetpotato cultivars. The parameters for efficient transfer of these genes and the conditions for de novo regeneration optimised in preliminary studies were used in the genetic transformation of Ugandan landrace \u2018Kyebandula\u2019 with Agrobacterium tumefaciens EHA 105 harbouring the plasmid pCIP84, which contains cry7Aa1, cry3Ca1 and nptII in its T-DNA. Fifty-four percent of the explants formed adventitious buds. With a mean of 7 buds formed per explant, 6.0% explants formed shoots with a mean of one shoot per explant for those explants that formed shoots on medium containing 50 mg L-1 kanamycin as a selection agent. PCR analysis using primers for cry7Aa1 showed that the transformation efficiency could be as high as 2%. These data highlight the potential of genetic transformation in transferring resistance genes and pave way for enhancement of food security through production of adapted sweetpotato weevil resistant cultivars.La patate douce ( Ipomoea batatas Lam.) a un potentiel de contenir la faim, la malnutrition et la pauvret\ue9 en Afrique Sub Saharienne \ue9tant donn\ue9 sa pr\ue9cocit\ue9 et son grand rendement avec peu d\u2019intrants. Par ailleurs, sa productivit\ue9 est trop basse due aux diverses contraintes li\ue9es aux maladies virales et attaques sans cesse croissante des charan\ue7ons Cylas puncticollis and C. brunneus . Une r\ue9sistance efficace au charan\ue7on n\u2019a pas encore \ue9t\ue9 identifi\ue9e dans la collection des g\ue8nes de la patate douce. D\u2019autre part, les g\ue8nes de r\ue9sistance aux charan\ue7ons, cry7Aa1 et cry3Ca1 \ue9taient assembl\ue9es un vecteur de plasmide pour utilisation dans la transformation g\ue9n\ue9tique des cultivars de patate douces africaines. Les param\ue8tres pour transfert d\u2019efficacit\ue9 de ces g\ue8nes et les conditions de r\ue9g\ue9n\ue9ration de novo optimis\ue9es dans des \ue9tudes pr\ue9liminaires \ue9taient utilis\ue9es dans la transformation g\ue9n\ue9tique du landrace ougandais \u2018Kyebandula\u2019avec l\u2019 Agrobacterium tumefaciens EHA 105 portant le plasmide pCIP84, contenant les cry7Aa1, cry3Ca1 et nptII dans son T-ADN. Cinquante quatre pourcent des explants ont form\ue9 des bourgeons adventices. Avec une moyenne de 7 bourgeons par explant, 6.0% d\u2019explants ont form\ue9 des tiges avec une moyenne d\u2019une tige par explant pour ces explants qui ont form\ue9 des tiges sur le media contenant 50 mg L-1 de kanamycine comme agent de s\ue9lection. L\u2019analyse par PCR utilisant des primers pour cry7Aa1 a montr\ue9 que la transformation efficace pourrait \ueatre aussi \ue9lev\ue9e que 2%. Ces donn\ue9es soulignent le potentiel de transformation g\ue9n\ue9tique dans le transfert des g\ue8nes de r\ue9sistance et un moyen d\u2019am\ue9liorer la s\ue9curit\ue9 alimentaire \ue0 travers la production des cultivars de r\ue9sistance adapt\ue9e aux charan\ue7ons de la patate douce