Molecular screening of equine piroplasmosis and hemoplasmas in donkeys from Somalia

Orientador: Prof. Dr. Rafael Felipe da Costa VieiraCoorientador: Prof. Dr. Ahmed Abdulkadir Hassan-KadleDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 12/08/2022Inclui referênciasResumo: A piroplasmose equina (PE) é uma doença infecciosa transmitida por carrapatos de equídeos (cavalo, burro, mula e zebra), causada por Babesia caballi e Theileria equi. A PE é uma doença de notificação compulsória que possui ampla distribuição na maioria dos países tropicais e subtropicais do mundo. Os micoplasmas hemotrópicos (hemoplasmas) são os agentes causadores da anemia hemolítica infecciosa em mamíferos em todo o mundo. No entanto, poucos relatos em cavalos foram realizados até o momento. Faltam dados epidemiológicos e caracterização molecular da infecção por PE e hemoplasma na Somália, uma vez que os burros são usados para várias atividades, incluindo transportar mercadorias nas costas ou puxar carrinhos carregados com mercadorias como lenha, alimentos, água e materiais de construção. Considerando a importância socioeconômica e a falta de dados sobre esses patógenos em jumentos na Somália, este estudo teve como objetivo rastrear burros para infecção por PE e hemoplasma. Um total de 30 burros machos foram avaliados, amostrados de sangue e inspecionados quanto à presença de ectoparasitos. O DNA foi extraído do sangue total e as amostras foram ainda rastreadas usando ensaios de PCR em tempo real específicos da espécie visando o gene gene endógeno de mamífero gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (gapdh), ema-1 de T. equi e o gene 18S rRNA de B. caballi, e ensaio qPCR específico de gênero visando o 16S rRNA gene dos hemoplasmas. Os jumentos não estavam infestados por carrapatos no momento da amostragem. O gene gapdh foi consistentemente amplificado a partir de todas as amostras de jumentos. No geral, a prevalência de 22/30 (73,3%, IC 95%: 55,6 – 86,8%) foi qPCR-positiva para T. equi e B. caballi. Enquanto uma única infecção por T.equi foi observada em 3/30 (10%, IC 95%: 2,7 – 24,9%) dos jumentos. Todas as 30 amostras de jumento testaram negativo para hemoplasma por qPCR. Mais estudos avaliando um número maior de burros são necessários para estabelecer a presença de hemoplasmas na Somália. Até onde sabemos, este é o primeiro estudo sobre a investigação molecular de PE e hemoplasmas em jumentos da Somália.Abstract: Equine piroplasmosis (EP) is an infectious tick-borne disease of equids (horse, donkey, mule, and zebra) caused by Babesia caballi and Theileria equi. EP is a notifiable disease that has a wide distribution in most tropical and subtropical countries worldwide. Hemotropic mycoplasmas (hemoplasmas) are the causative agents of hemolytic infectious anemia in mammals worldwide. However, few reports on horses have been performed to date. Epidemiological data and molecular characterization of EP and hemoplasma infection in Somalia is missing since donkeys are used for various activities including to carry goods on their backs or pulling carts loaded with goods like firewood, foods, water, and construction materials. Considering the social-economic importance and the lack of data on these pathogens in donkeys in Somalia, this study aimed to screen donkeys for EP and hemoplasma infection. A total of 30 male donkeys were evaluated, blood sampled, and inspected for ectoparasites. DNA was extracted from whole blood, and samples further screened using by species-specific real-time PCR assays targeting the mammal endogenous gene glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (gapdh), ema-1 gene of T. equi and the 18S rRNA gene of B. caballi, and genus-specific qPCR assay targeting the 16S rRNA gene of hemoplasmas. Donkeys were not infested by ticks at the time of sampling. The gapdh gene was consistently amplified from all donkeys’ samples. Overall, prevalence of 22/30 (73.3%, 95% CI: 55.6 – 86.8%) were qPCR-positive for T. equi and B. caballi. While a single infection for T.equi was observed in 3/30 (10%, 95% CI: 2.7 – 24.9%) of donkeys. All 30 donkey samples tested negative for hemoplasma by qPCR. Further studies evaluating a higher number of donkeys are needed to establish the presence of hemoplasmas in Somalia. To the best of our knowledge, this is the first study on the molecular investigation of EP and hemoplasmas in donkeys from Somalia