Establishment of a three-dimensional tumor culture model

El desarrollo de técnicas de cultivos celulares 3D ha empezado a ofrecer resultados promisorios para el campo de la investigación en la biología del cáncer en los últimos años, sin embargo, es necesario seguir experimentando con protocolos para células tumorales y analizar sus ventajas o falencias con nuevas líneas celulares y/o material extraído de biopsias de diferentes tipos de tumores para los cuales aún no se han estandarizado técnicas de cultivo de ninguna clase. Es por ello que este trabajo tuvo como objetivo establecer un modelo de cultivo tridimensional tumoral con la técnica de esferoides tumorales multicelulares (MTS por sus siglas en inglés) a partir de líneas celulares tumorales y biopsias de tumores de cáncer gástrico y de endometrio, estableciendo protocolos para su siembra y análisis. Los esferoides fueron sembrados a partir de la línea celular SiHa, partiendo de cultivos en monocapa que posteriormente fueron tripsinizados para establecer una concentración ideal que fue sembrada en pozos recubiertos con agarosa al 1%. Con los esferoides ya formados, se están realizando ensayos para realizar cortes que permitan observar la estructura interna de los mismos, los cuales aún siguen en fase análisis. Al finalizar el tiempo de trabajo se logró establecer el protocolo para la siembra de un cultivo celular tridimensional con la técnica de esferoide tumoral multicelular (MTS) a partir de la línea celular SiHa, así como también se espera sembrar dichos esferoides a partir de los cultivos primarios establecidos de células tumorales de cáncer gástrico y de endometrio. Con este protocolo se abre campo a nuevas investigaciones de silenciamiento génico y de penetración de virus en sistemas tumorales más complejos.The development of 3D cell culture techniques has begun to offer promising results for the field of cancer biology research in recent years, however, it is necessary to continue experimenting with protocols for tumor cells and to analyze their advantages or shortcomings with new Cell lines and / or material extracted from biopsies of different types of tumors for which culturing techniques of any kind have not yet been standardized. Therefore, this work aimed to establish a three-dimensional tumor culture model using the multicellular tumor spheroids (MTS) technique from tumor cell lines and biopsies of gastric and endometrial cancer tumors, establishing protocols For their sowing and analysis. The spheroids were cultured from the SiHa cell line, starting from monolayer cultures that were subsequently trypsinized to establish an ideal concentration that was seeded in wells coated with 1% agarose. With the spheroids already formed, tests are being carried out to make cuts that allow to observe the internal structure of the same, which are still in the analysis phase. At the end of the working time, it was possible to establish the protocol for the sowing of a three-dimensional cell culture using the multicellular tumor spheroid technique (MTS) from the SiHa cell line, as well as to seed these spheroids from the cultures Established primary tumor cells of gastric and endometrial cancer. This protocol opens the door to new research on gene silencing and virus penetration in more complex tumor systems.Instituto Nacional de Cancerologí