Statiinien kvantitatiivisen analyysimenetelmän validointi verinäytteille LC-MS/MS-analyysitekniikalla

Opinnäytetyö tehtiin Terveyden ja hyvinvoinnin laitoksen oikeuskemian yksikössä Helsingin toimipisteellä. Opinnäytetyön tavoitteena oli validoida kvantitatiivinen määritysmenetelmä statiineille veri- ja seeruminäytteistä käyttämällä LC-MS/MS-analyysitekniikkaa. Validoinnin avulla selvitettiin menetelmän toimivuus. Statiinit ovat kohonneen kolesterolin hoidossa käytettäviä lääkeaineita. Statiinit estävät solujen kolesterolisynteesiä. Suomessa on markkinoilla kuusi eri statiinia: atorvastatiini, rosuvastatiini, simvastatiini, lovastatiini, fluvastatiini ja pravastatiini. Tässä opinnäytetyössä validoitiin kaikkien muiden statiinien, paitsi pravastatiinin analyysi-menetelmä. Validoinnissa tutkittiin seuraavia validointiparametreja: selektiivisyys, toteamisraja, alempi määritysraja, saanto, oikeellisuus, toistettavuus, prosessoitujen näytteiden säilyvyys, uusittavuus, mittausepävarmuus, matriisivaikutus ja laimennettujen näytteiden poikkeavuus. Lisäksi atorvastatiinin ja rosuvastatiinin kohdalla uuden määritysmenetelmän tuloksia verrattiin vanhalla määritysmenetelmällä saatuihin tuloksiin. Simvastatiinin, lovastatiinin ja fluvastatiinin kohdalla vertailua ei voitu tehdä, sillä niitä ei ole aikaisemmin analysoitu. Validoinnin perusteella määritysmenetelmä sopii hyvin atorvastatiinin ja rosuvastatiinin määritykseen. Fluvastatiinin, lovastatiinin ja simvastatiinin osalta validointi hylättiin. Niille tilattiin uudet deuteroidut sisäiset standardit menetelmän luotettavuuden ja toistettavuuden parantamiseksi. Lisäksi ennen menetelmän käyttöönottoa uuttoa muokataan, jotta näytteistä saadaan puhtaampia. Näiden muutosten jälkeen menetelmä validoidaan käyttöön