Estudo do efeito de ácidos graxos livres sobre mitocôndrias

Orientador: Aguinaldo José do NascimentoTese (Doutorado) -Universidade Federal do Paraná. Curso de Pós-Graduaçao em BioquímicaResumo: Utilizando-se técnicas espectrofotometricas e polarograficas convencionais, foi analisado o efeito de sais de ácidos graxos de cadeia longa e DNP sobre o metabolismo mitocondrial e foram feitas determinações dos níveis de lipoperoxidos em mitocôndrias frescas isoladas de fígado de rato, em mitocôndrias envelhecidas e em mitocôndrias preservadas em meio de incubação de Montano et al. (Arq.Biol.Tecnol,jT4:375-384,1981. Baixas concentrações de sais de ácidos graxos estimularam a respiração e o RC mitocondrial. A adição de concentrações crescentes destes compostos inibiu a respiração e reduziu o RC a unidade. A relação ADP:0 também sofreu uma redução, possível mente por ter havido uma redução na transposição de ADP através da membrana mitocondrial. A adição de oleato a mitocôndrias intactas alterou a sua integridade estrutural e desfez o potencial de membrana e em partículas submitocondriais de coração bovino, houve um estimulo na atividade da ATPase dependente da concentração do substrato. ; A respiração mitocondrial no estado IV sofreu um estímulo seguido de inibição na presença de concentrações crescentes de DNP e o RC foi reduzido rapidamente a unidade. A adição de oleato a mitocôndrias parcialmente desacopladas por DNP, restaurou a respiração e o RC a níveis normais. Mitocôndrias preservadas em meio de incubação de Montano et al., apresentaram um declínio na atividade da ATPas estimulada por DNP, com o tempo de incubação. Foram feitas determinações dos níveis de lipoperoxidos monitoradas pela reação cotn o T B A e por leituras espectrofotome vZ tricas da absorção em 233nm. Em mitocôndrias envelhecidas os níveis de lipoperoxidos aumentaram gradativamente durante 120 horas, enquanto que em mitocôndrias preservadas esses níveis aumentaram rapidamente atingindo um máximo entre 24 e 48 horas. Nestas condições o RC e os níveis de Pi total sofreram uma redução em torno de 40%, com relação a mitocôndria fresca e continuaram diminuindo com o decaimento nos níveis de lipoperoxidos. Estes resultados sugerem que houve um estimulo na formação de lipoperoxidos, quando foram preservadas as atividades vitais da mitocôndria. E discutido neste trabalho, um possível relaciona mento entre o efeito de ácidos graxos livres sobre mitocôndrias frescas e sua peroxidacao na suspensão mitocondrial