The human skin barrier model containing stripped stratum corneum

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biophysics and Physical Chemistry Author: Romana Soukupová Supervisor: Mgr. Petra Pullmanová, Ph.D. Title of diploma thesis: The human skin barrier model containing stripped stratum corneum The uppermost layer of the epidermis, the stratum corneum, acts as a protective skin barrier. It contains a lipid matrix, which is made up of ceramides, cholesterol, and free fatty acids. The composition and arrangement of these lipids are necessary for the proper function of the skin barrier. Corneocytes, which do not have nuclei, are distributed in the lipid matrix. They are surrounded by insoluble proteins with covalently bound lipids on their surface, creating the corneocyte lipid envelope. The aim of this diploma thesis was to prepare models of the human skin barrier using an isolated stratum corneum with a preserved corneocyte lipid envelope and without a preserved corneocyte lipid envelope, and then monitor and compare the lipid arrangements in these models. Obtaining the stratum corneum from the skin samples was necessary to prepare the models. Human skin lipids were extracted from isolated stratum corneum and part of this delipidated stratum corneum was saponified. Skin lipids were purificated by column chromatography, and their...Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Autor: Romana Soukupová Školitel: Mgr. Petra Pullmanová, Ph.D. Název diplomové práce: Model lidské kožní bariéry s využitím tenkých vrstev stratum corneum Nejsvrchnější vrstva epidermis, stratum corneum, zastává funkci ochranné kožní bariéry. Obsahuje lipidovou matrix, která je tvořena ceramidy, cholesterolem a volnými mastnými kyselinami. Složení a uspořádání těchto lipidů je důležité k zajištění správného fungování kožní bariéry. V lipidové matrix jsou dále rozmístěny bezjaderné korneocyty, které jsou na svém povrchu obklopeny nerozpustnými proteiny s kovalentně navázanými lipidy tvořící korneocytární lipidovou obálku. Cílem této diplomové práce bylo připravit modely lidské kožní bariéry s využitím izolovaného stratum corneum se zachovalou korneocytární lipidovou obálkou a bez zachovalé korneocytární lipidové obálky a následně v těchto modelech sledovat a porovnat uspořádání lipidů. Pro přípravu modelů bylo potřeba ze vzorků kůže získat stratum corneum, ze kterého se následně izolovaly lidské kožní lipidy. Část takto delipidizovaného stratum corneum byla dále saponifikována. Po purifikaci kožních lipidů sloupcovou chromatografií se zjišťovalo jejich složení pomocí vysokoúčinné tenkovrstvé...Department of Biophysics and Physical ChemistryKatedra biofyziky a fyzikální chemieFarmaceutická fakulta v Hradci KrálovéFaculty of Pharmacy in Hradec Králov