RUOLO DELLA SUPEROSSIDO DISMUTASI DI Enterococcus faecalis SULLA REATTIVITA\u2019 DELLA MICROGLIA IN VITRO

Introduzione Enterococcus faecalis \ue8 un batterio responsabile di gravi infezioni nosocomiali del tratto urinario, endocarditi e sepsi, a cui segue, seppur raramente, la meningite con una mortalit\ue0 del 21%. Mediante l\u2019uso di ceppi batterici knock-out (ko), abbiamo recentemente dimostrato (1) che l\u2019assenza di MnSOD rende il batterio pi\uf9 suscettibile al killing intracellulare della microglia. In questo studio, \ue8 stato valutato il ruolo della MnSOD sulla reattivit\ue0 della cellula microgliale all\u2019infezione con E. faecalis, analizzando l\u2019espressione dei recettori purinergici P2Y6 e P2Y12, l\u2019induzione di NFkB ed il rilascio di citochine proinfiammatorie e ossido nitrico (NO). Metodi L\u2019espressione di P2Y6 e P2Y12 in cellule microgliali BV2 incubate con i diversi ceppi batterici \ue8 stata analizzata mediante indagini citofluorimetriche. Il dosaggio di citochine (IL-1 \u3b2, TNF-\u3b1 e MIP-1 \u3b1.) e di NO nei surnatanti \ue8 stato eseguito rispettivamente mediante saggio Elisa e reattivo di Griess; la determinazione di NFkB in lisati cellulari \ue8 stata effettuata mediante kit \u201cNuclear Extract Kit\u201d e \u201cTransAMtm NFkB\u201d. Risultati I dati ottenuti mostrano un aumento di P2Y6 e una diminuzione di P2Y12 in cellule microgliali infettate con il mutante MnSOD-ko, rispetto a cellule esposte al ceppo parentale JH2-2. Nelle stesse cellule, si osserva una maggiore induzione di NFkB ed una pi\uf9 elevata produzione di citochine proinfiammatorie e di NO. Conclusioni Questi risultati forniscono una prima evidenza sul ruolo immunomodulatorio della MnSOD di E. faecalis nei confronti della cellula microgliale. La resistenza di E. faecalis al killing intracellulare mediato dalla microglia, osservata in precedenza (1), pu\uf2 essere pertanto spiegata con la ridotta attivazione della cellula microgliale in presenza di MnSOD batterica. 1) Peppoloni et al., Microbiology, 201