Il gene AFR1 di Cryptococcus neoformans codificante per un trasportatore ABC, altera la resistenza del patogeno alla microglia: ritardo nella maturazione dei fagosomi.

Introduzione: Cryptococcus neoformans (Cn) \ue8 un fungo opportunista patogeno dotato di spiccato neurotropismo suscettibile almeno in vitro alle difese mediate dalla microglia (1). Recentemente, \ue8 stato dimostrato come l\u2019iperespressione del gene AFR1 conferisce a Cn sia la resistenza al fluconazolo (2) che un\u2019aumentata virulenza (3). Il presente studio intende valutare il ruolo del fenotipo AFR1 nell\u2019interazione tra Cn e l\u2019immunoeffettore cerebrale.Materiali e metodi: l\u2019 isolato clinico BPY22 e due suoi mutanti in cui il gene AFR1 \ue8 stato deleto per mutagenesi inserzionale (ceppo BPY444) o reintrodotto sotto il controllo del promotore forte gpd1 (ceppo BPY445) (3), sono stati impiegati in saggi di infezione in cellule di microglia (1) in vitro e quindi comparati per i) suscettibilit\ue0 a fagocitosi e al killing e ii) maturazione fagosomiale. Risultati: i ceppi saggiati hanno dimostrato: a) simile suscettibilit\ue0 alla fagocitosi, b) diversa sensibilit\ue0 al killing e c) diversa maturazione dei fagosomi; in particolare, il processo di maturazione \ue8 significativamente ritardato (ridotta acidificazione e comparsa di marcatori tardivi quali Rab7, Rab9 e LAMP2) nei vacuoli di fagocitosi contenenti il ceppo che iperesprime il gene AFR1. Conclusioni: questi dati definiscono il ruolo del gene AFR1 nella resistenza di Cn alla cellula microgliale dimostrandone la capacit\ue0 di interferire con l\u2019acidificazione e la maturazione del fagosoma e di conseguenza con la sopravvivenza intracellulare del patogeno