Detecção e caracterização molecular de hemoplasmas e patógenos transmitidos por carrapatos em quatis-de-cauda-anelada (Nasua nasua) do Parque Nacional do Iguaçu, Foz do Iguaçu, Paraná

Orientador: Prof. Dr. Rafael F. C. VieiraCoorientadora: Dra. Thállitha S. W. J. VieiraDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 22/02/2022Inclui referênciasResumo: As unidades de conservação ambiental são porções de terra que abrigam fauna e flora nativa, protegidas por lei, essenciais para a conservação da biodiversidade, recursos naturais, macro e micro ecossistemas e de espécies raras e ameaçadas de extinção. A APA mais importante de conservação da Mata Atlântica é o Parque Nacional do Iguaçu (PNI), Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil, que faz fronteira com Puerto Iguazú, Misiones, Argentina. Os mamíferos terrestres mais vistos no PNI são os quatis-de-cauda-anelada (Nasua nasua Linneaus, 1976) que estão em constante contato com os turistas pedindo e/ou roubando alimentos dos visitantes. Micoplasmas hemotrópicos (hemoplasmas) são bactérias intracelulares obrigatórias, não cultiváveis in vitro e sem parede celular que parasitam a superfície dos eritrócitos de uma grande variedade de mamíferos. Em quatis, uma potencial nova espécie de hemoplasma foi descrita infectando animais das regiões centro-oeste e sul do Brasil. Portanto, os objetivos deste estudo foram investigar a ocorrência de Mycoplasma sp. e patógenos transmitidos por carrapatos em quatis do PNI. Amostras de sangue foram coletadas de 18 quatis e submetidas a análises moleculares por ensaios de PCR convencional (cPCR) para Mycoplasma sp. (rRNA16S e 23S), Theileria/Babesia spp. (18S rRNA) e Ehrlichia/Anaplasma sp. (16S rRNA, sodB, dsb e groEL). Oito de 18 (44,44%; IC 95%: 24,56%-66,28%) animais foram positivos para Mycoplasma spp. Todos os quatis de cauda anelada testaram negativo para Theileria/Babesia spp. e apenas um dos 18 (5,56%; IC 95%:0,99%-25,76%) animais testou positivo para Ehrlichia/Anaplasma spp. pelo 16S rRNA cPCR. Infelizmente, várias tentativas de sequenciar o gene 16S rRNA da amostra positiva para Ehrlichia/Anaplasma falharam. A análise filogenética e de rede de haplótipos dos fragmentos dos genes 16S e 23S rRNA confirmaram que o Mycoplasma sp. detectado nestes animais fora relatado anteriormente em quatis-de-cauda-anelada do Brasil. O nome 'Candidatus Mycoplasma haematonasua' foi proposto para este novo organismo.Abstract: Environmental Protection Areas (EPAs) are portions of land that shelter native fauna and flora, protected by law, essential for the conservation of biodiversity, natural resources, macro and micro ecosystems and endangered species. The most important conservation EPA of the Atlantic Forest is the Iguaçu National Park (INP), Foz do Iguaçu, Paraná, Brazil, in the border area with Puerto Iguazú, Misiones, Argentina. The most terrestrial mammals visualized in the INP are the ring-tailed coatis (Nasua nasua Linneaus, 1976) that are in constant contact with tourists asking for and/or stealing food from visitors. Hemotropic mycoplasmas (hemoplasmas) are obligate intracellular, non-cultured in vitro and without cell walls that parasitize the surface of erythrocytes of a wide variety of mammals. A potentially novel haemotropic Mycoplasma sp. has been previously detected in the ring-tailed coatis from central-western and southern Brazil. Therefore, the aims of this study were to investigate the occurrence of haemotropic Mycoplasma sp. and tickborne pathogens in wild ring-tailed coatis from the INP, Foz do Iguaçu municipality, Paraná State, southern Brazil. Blood samples were collected from 18 wild ring-tailed coatis and evaluated by conventional PCR (cPCR) assays for haemotropic Mycoplasma spp. (16S and 23S rRNA), Theileria/Babesia spp. (18S rRNA) and Ehrlichia/Anaplasma spp. (16S rRNA, sodB, dsb and groEL). Eight out of 18 (44.44%; 95% CI: 24.56%-66.28%) animals were positive for haemotropic Mycoplasma spp. All ring-tailed coatis tested negative for Theileria/Babesia spp. and only one out of 18 (5.56%; 95% CI: 0.99%-25.76%) animals tested positive for Ehrlichia/Anaplasma spp. by the 16S rRNA cPCR. Unfortunately, multiple attempts to sequence the 16S rRNA gene of the Ehrlichia/Anaplasma-positive sample have failed. Phylogenetic and network analysis of the hemoplasma 16S and 23S rRNA gene fragments confirmed that animals were infected by a potentially novel haemotropic Mycoplasma sp. previously reported in ring tailed coatis from Brazil. The name 'Candidatus Mycoplasma haematonasua' is proposed for this novel organism