Vývoj UHPLC-DAD metody pro separaci fenolických látek z rostlinného materiálu a optimalizace jejich extrakce

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Anna Turčanová Supervisor: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Advisor: Mgr. Marcela Hollá Title of the diploma thesis: Development of UHPLC-DAD method for separation of phenolic substances in plant material and extraction optimization This diploma thesis deals with development of UHPLC-DAD method for separation of selected phenolic substances (arbutin, chlorogenic, neochlorogenic, cryptochlorogenic, isochlorogenic A and caffeic acid, cynarin, catechin, epicatechin, rutin, hyperoside, hirsutrin, reynoutrin, guaiaverin, quercitrin and quercetin). UHPLC analysis of these phenolic substances took place on a Luna® Omega Polar C18 100 (150 x 2.1 mm; 1.6 μm) column with fully porous particles. As a part of the optimization method, a column with core-shell particles (Kinetex® Polar C18) and a column with a hybrid stationary phase (YMC-Triart C18 ExRS) were also tested. The sample injection volume was 2 μl, the flow rate has been set to 0.3 ml/min and temperature of the column has been set to 30 řC. As a mobile phase ultrapure water acidified with acetic acid to pH 2.8 in combination with acetonitrile has been used. The total analysis time was 17.5 min and detection was performed using a DAD detector at...Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytickej chémie Kandidát: Anna Turčanová Školiteľ: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Marcela Hollá Názov diplomovej práce: Vývoj UHPLC-DAD metódy na separáciu fenolických látok z rastlinného materiálu a optimalizácia ich extrakcie Táto diplomová práca sa zaoberá vývojom UHPLC-DAD metódy na separáciu vybraných fenolických látok (arbutín, kyselina chlorogénová, neochlorogénová, kryptochlorogénová, izochlorogénová A a kávová, cynarín, katechín, epikatechín, rutín, hyperozid, hirsutrín, reynoutrín, guaijaverín, kvercitrín a kvercetín). UHPLC analýza týchto fenolických látok prebiehala na kolóne Luna® Omega Polar C18 100 (150 x 2,1 mm; 1,6 μm) s plne poréznymi časticami. V rámci optimalizácie metódy bola testovaná aj kolóna s povrchovo poréznymi časticami (Kinetex® Polar C18) a kolóna s hybridnou stacionárnou fázou (YMC-Triart C18 ExRS). Dávkovaný objem vzorky bol 2 μl, prietoková rýchlosť bola nastavená na 0,3 ml/min a teplota kolóny na 30 řC. Ako mobilná fáza bola použitá ultračistá voda okyslená kyselinou octovou na pH 2,8 v kombinácii s acetonitrilom. Celková doba analýzy bola 17,5 min a detekcia prebiehala pomocou DAD detektora pri vlnových dĺžkach 254, 280, 320 a 365 nm. Optimalizovaná UHPLC-DAD metóda...Department of Analytical ChemistryKatedra analytické chemieFarmaceutická fakulta v Hradci KrálovéFaculty of Pharmacy in Hradec Králov