Estudio de los efectos de la combinación de sorafenib e inhibidores de sirtuinas 1 y 2 sobre cultivos 2d y 3d de líneas celulares de hepatocarcinoma

La resistencia a multidrogas (MDR) suele ser el factor determinante de la falla de las quimioterapias. En el hepatocarcinoma celular (HCC) la MDR se produce por la sobreexpresión de transportadores ABC (ATPBinding Cassette) como la P-glicoproteína (P-gp) y la proteína asociada a resistencia a multidrogas 3 (MRP3). Por otra parte, en esta patología también se ven aumentadas las sirtunas 1 y 2 (SIRTs 1 y 2). Estas son histonas desacetilasas de tipo III que desacetilan a factores de transcripción como FoxO (clase O de factores de transcripción Fox) y p53, inhibiendo la capacidad de los mismos de inducir apoptosis. Además, FoxO desacetilado aumenta la expresión de P-gp. Sorafenib (Sfb) es actualmente el único quimioterapéutico aprobado como tratamiento en pacientes con HCC avanzado. Sfb es sustrato de los transportadores ABC, los cuales bombean al fármaco fuera de la célula disminuyendo su concentración intracelular, reduciendo así su eficacia y produciendo la falla de la terapia. En otras palabras, las células malignas se vuelven refractarias al fármaco. El grupo de trabajó demostró que los inhibidores de SIRTs cambinol (Camb) y EX-527 (EX) modulan la expresión de P-gp y MRP3 y disminuyen la sobrevida y migración de dos líneas celulares de HCC. Con esto en mente, nuestra hipótesis de trabajo se basó en que la inhibición de la actividad de las histonas desacetilasas durante el tratamiento con Sfb (tratamientos combinados) reduce la MDR y exacerba los efectos antitumorales de Sfb. En una primera instancia, realizamos el silenciamiento de SIRTs 1 y 2 y corroboramos que efectivamente las mismas modulan la expresión de los transportadores P-gp y MRP3. Luego, observamos que los tratamientos combinados disminuyen la viabilidad celular en relación al tratamiento con Sfb sólo tanto en cultivos 2D cómo 3D, siendo estos últimos cultivos más resistentes a los compuestos. Por otro lado, la proliferación celular se redujo en presencia de los tratamientos combinados en cultivos 3D. Los tratamientos combinados fueron capaces además de aumentar la apoptosis generada por Sfb en ambos tipos de cultivo, y finalmente, disminuyeron la migración celular en comparación a la obtenida en presencia de Sfb. En base a estos resultados pudimos concluir que los tratamientos combinados exacerban los efectos de Sfb sobre la sobrevida y migración celular, avalando la potencial aplicación de inhibidores de SIRTs 1 y 2 en combinación con Sfb durante la terapia del HCC. Los resultados obtenidos a partir de los cultivos 3D, que mimetizan características de los tumores in vivo, refuerzan la relevancia clínica de los resultados hallados.Fil: Antonella, Angel. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Área Morfología. Instituto de Fisiología Experimental. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (IFISE-CONICET); Argentina