Discriminazione rapida fra ceppi vaccinali e di campo di Metapneumovirus aviare mediante tecnica RFLP

In Italia l\u2019infezione da Metapneumovirus aviare (AMPV) si \ue8 diffusa a partire dal 1987. Successivamente si \ue8 endemizzata nelle Regioni a maggior vocazione avicola, con prevalenza del sottotipo B. Per il controllo delle infezioni da AMPV nell'allevamento del tacchino sono utilizzati vaccini vivi attenuati; fra quelli disponibili nel nostro Paese \ue8 diffuso l\u2019utilizzo del sottotipo B, somministrato nei tacchini da carne, via spray, in incubatoio. E\u2019 stato dimostrato che ceppi vaccinali possono essere evidenziati tramite RT-PCR fino alla quarta settimana di et\ue0, associati o meno a sintomatologia respiratoria. In presenza di forme cliniche risulta necessario poter discriminare tra ceppi di campo e di origine vaccinale. L'analisi della sequenza del gene G di numerosi ceppi AMPV sottotipo B isolati in varie aree geografiche del mondo, ha rivelato la presenza, nella sola sequenza del vaccino B (ceppo VCO3) maggiormente utilizzato in Italia, di un sito di riconoscimento dall\u2019enzima di restrizione Msel. Tale sito \ue8 localizzato nell'amplicone che si ottiene con il protocollo di RT nested-PCR messo a punto da Naylor et al., e comunemente impiegato in Europa per la diagnosi delle infezioni da AMPV e la distinzione fra sottotipi A e B. Basandosi su queste evidenze, \ue8 stato messo a punto e testato su alcuni AMPV isolati in Italia un protocollo di PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) in grado di discriminare fra ceppi sottotipo B di campo e vaccinali