Caractérisation et clonage du récepteur de l'interleukine-9 chez la souris

Interleukin-P (IL-9) is a T cell-derived cytokine that induces the proliferation of various lymphoid and hematopoietic cells. Recombinant murine IL-9 expressed in a baculovirus system allowed us to demonstrate the existence of saturable and specific binding sites for IL-9. Scatchard analysis was consistent with the existence of a single class of receptors with a Kd of ∼ 100 pM. Cross-linking studies indicated that the IL-9 receptor consisted of a 64 kD glycoprotein, the molecular weight of which was reduced to 54 kD after deglycosylation. Specific binding sites for murine IL-9 were detected on T helper clones, on several T cell tumors, on macrophages and on mast cell lines. A cDNA encoding the murine IL-9 receptor was isolated by expression cloning. Affinity constant and molecular weight of the protein encoded by this cDNA are similar to those described for the native receptor. Sequence analysis indicated that the IL-9 receptor belongs to the hematopoietin receptor familyL’interleukine-9 (IL-9) est une cytokine sécrétée par certains clones de lymphocytes T auxiliaires et qui stimule la prolifération de diverses cellules lymphoïdes et hématopoiétiques. A l’aide de la protéine recombinante exprimée dans le système du baculovirus, nous avons démontré l’existence de récepteurs spécifiques et saturables pour l’IL-9 murine. A l’équilibre, nous avons détecté la présence d’une seule classe de récepteurs caractérisés par une constante d’affinité de ~10pM. Par couplage covalent de l’IL-9 à son récepteur, la taille de la chaîne qui fixe l’IL-9 a été évaluée à 64 kD, celle-ci étant réduite à 54 kD après déglycosylation. Des sites de fixation spécifiques de l’IL-9 murine ont été détectés sur des clones de lymphocytes T auxiliaires, sur plusieurs lignées tumorales d’origine T, sur des macrophages ainsi que sur des lignées mastocytaires. Un cDNA codant pour le récepteur de l’IL-9 murine a été isolé par une méthode de clonage par expression. L’analyse de la séquence révèle la présence des séquences consensus des récepteurs de la famille des facteurs hématopoiétiques. La constante d’affinité et la taille du récepteur cloné sont semblables à celles mesurées pour le récepteur naturelThèse de doctorat en sciences pharmaceutiques -- UCL, 199