Pengaruh Penambahan Ion Logam Fe2+, Zn2+, Cu2+ dan Ion NH4+ Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase dari Bacillus subtilis Strain SF01

Telah dilakukan karakterisasi lanjut terhadap ekstrak kasar enzim selulase asal Bacillus subtilis strain SF01, yaitu menentukan manakah dari antara ion logam Fe2+, Zn2+, Cu2+ dan ion NH4+ yang dapat menjadi aktivator atau inhibitor. Produksi selulase dilakukan dengan fermentasi Bacillus subtilis strain SF01 pada media Nutrient Broth (NB) + Karboksimetilselulosa (CMC) 1% selama 20 jam. Enzim ditentukan kadar proteinnya dengan metode Bradford dengan pembanding Bovine Serum Albumin (BSA). Ekstrak kasar enzim selulase ditambahkan larutan ion dengan variasi konsentrasi 0 mM, 1 mM, 5 mM, 10 mM, 50 mM, 100mM dan diinkubasi selama 20 menit dengan suhu 60oC, kemudian enzim selulase ditambahkan substrat CMC 1% pada pH 5,0 dan diinkubasi kembali dengan suhu 60oC selama 45 menit. Setelah dilakukan inkubasi, ekstrak kasar enzim selulase direaksikan dengan asam 3,5-dinitrosalisilat (DNS) dan diamati secara spektrofotometri pada λ 550 nm. Aktivitas enzim dibandingkan dengan kontrol tanpa ion logam (0 mM) dan dianalisis dengan One Way ANOVA (=95%) dilanjutkan dengan post hoc Tukey HSD. Penambahan ion logam Fe2+ dan ion NH4+ tidak mempengaruhi aktivitas, namun pemberian ion logam Cu2+ dan Zn2+ mulai pada konsentrasi 5 mM bersifat sebagai inhibitor ekstrak kasar enzim selulase asal Bacillus subtilis strain SF01