Micropropagación y análisis bioquímico de mimbrera, castaño y ciruelos cultivados en biorreactores con diferentes concentraciones de sacarosa

Programa Oficial de Doutoramento en Bioloxía Celular e Molecular . 5004V01[Resumen] Se ha investigado el efecto de la concentración de sacarosa en el medio de cultivo sobre el desarrollo de brotes axilares de tres especies leñosas cultivadas in vitro en medio líquido en biorreactores, con el objetivo de conseguir su propagación fotoautotrófica. El material vegetal consistió en dos clones de Castanea sativa x Castanea crenata, que se cultivaron en un sistema de inmersión temporal Plantform® y en un sistema de inmersión continua de 6 litros, en dos variedades locales de Prunus doméstica y en un clon de Salix viminalis, que se cultivaron en biorreactores de inmersión temporal RITA®. Para lograr la propagación fotoautotrófica los cultivos crecieron con intensidad de luz media o alta (50 o 150 μmol m-2 s-1) y fueron suplementados o no con aire enriquecido con CO2. A fin de caracterizar el efecto de la sacarosa y las condiciones de cultivo en el desarrollo de los explantos se analizaron sus medidas morfológicas, compuestos fenólicos solubles totales, compuestos antioxidantes, pigmentos fotosintéticos, contenido en azúcares, capacidad de enraizamiento y aclimatación. Se ha conseguido cultivar la mimbrera sin azúcar exógeno y reducir hasta un sexto y un tercio la concentración de azúcar convencional en castaño y ciruelos, respectivamente[Resumo] Investigouse o efecto da concentración de sacarosa no medio de cultivo no desenvolvemento de brotes axilares de tres especies leñosas cultivadas in vitro en medio líquido en biorreactores, co obxectivo de conseguir a súa propagación fotoautótrofa. O material vexetal estaba formado por dous clons de Castanea sativa x Castanea crenata, que se cultivaron nun sistema de inmersión temporal Plantform® e nun sistema de inmersión continua de 6 litros, dúas variedades locais de Prunus domestica e un clon de Salix viminalis. cultivados en biorreactores de inmersión temporal RITA®. Para conseguir a propagación fotoautótrofa, os cultivos cultiváronse con intensidade luminosa media ou alta (50 ou 150 μmol m-2 s-1) e complementáronse ou non con aire enriquecido en CO2. Para caracterizar o efecto da sacarosa e as condicións de cultivo no desenvolvemento dos explantos, analizáronse as súas medidas morfolóxicas, compostos fenólicos solubles totais, compostos antioxidantes, pigmentos fotosintéticos, contido en azucres, capacidade de enraizamento e aclimatación. Foi posible cultivar o vimbio sen azucre esóxeno e reducir a concentración de azucre convencional en castiñeiros e ameixeiras ata nun sexto e nun terzo, respectivamente.[Abstract] The effect of sucrose concentration in the culture medium on the development of axillary shoots of three woody species grown in vitro in liquid medium in bioreactors has been investigated, with the aim of achieving their photoautotrophic propagation. The plant material consisted of two clones of Castanea sativa x Castanea crenata, which were grown in a Plantform® temporary immersion system and in a 6-liter continuous immersion system, two local varieties of Prunus domestica and one clone of Salix viminalis, which were grown in RITA® temporary immersion bioreactors. To achieve photoautotrophic propagation, cultures were grown with medium or high light intensity (50 or 150 μmol m-2 s-1) and were supplemented or not with CO2 enriched air. In order to characterize the effect of sucrose and culture conditions on the development of explants, their morphological measurements, total soluble phenolic compounds, antioxidant compounds, photosynthetic pigments, sugar content, rooting capacity and acclimatization were analyzed. It has been possible to grow willow without exogenous sugar and reduce the concentration of conventional sugar in chestnut and plum trees by up to one sixth and one third, respectively