Criopreservação de embriões de camundongos e bovinos utilizando metanol como crioprotetor.

RESUMO - Embriões de camundongos coletados no quarto dia após a injeção de I-ICG foram colocados diretamente em uma solução 3 M de metanol em P85 suplementado com 10% de soro fetal bovino (P855), à temperatura ambiente, durante dez minutos. Foram acondicionados em "paillets" de 0,25 ml e colocados diretamente a - 10 0C durante cinco minutos antes e durante seis minutos depois de induzir a formação de gelo. O descongelainento foi realizado em banho-maria a 370C durante 20 segundos. Os embriões foram colocados diretamente em P855, lavados duas vezes e colocados em cultura utilizando meio T 6suplementado com 10% de soro fetal bovino, a 370C numa atmosfera umedecida dc 5% CO2, 5% 02 e 90% N2. Os embriões bovinos foram coletados de fêmeas superovuladas, sete dias após o cio, e processados da mesma maneira que os embriões de camundongo. Dos 104 embriões de camundongo criopreservados e descongelados, 48,2% continuaram seu desenvolvimento cm cultura. Dos 20 embriões bovinos criopreservados e descongelados, oito foram transferidos diretamente a receptoras, e doze foram colocados em cultura. Nenhuma das receptoras ficou gestante e nenhum dos embriões continuou seu desenvolvimento em cultura. ABSTRACT - Mouse embryos were collccted from superovulated animais on the fourth day after IICG injection. They were put directly into a solution of 3 M methanol in PBSS at room temperature during ten minutes. Thawing was carried out in a waterbatb at 37 0C during 20seconds. Embryos were placed directly into PBSS washed twice and put into culture using medium T6supplemented with 10% fetal calf serum at 37 °C in a humid atmosphere of 5% CO2 , 5% 02 and 90% N2 . Bovine embryos were cultured under the same conditions, only using PBS supplemented with 20% fetal calf serum as culture medium. Of the 104 frozen mouse embryos, 48,2% continued developing in culture after thawing. None of the eight bovine embryos that were thawed and transferred directly to recipients resulted in pregnancy and none of the twelve bovine embryos thatwere thawed and put into culture continued to develop