Isolasi, uji toksisitas, dan identifikasi fraksi alkaloid pada biji pepaya (Carica papaya L.)

INDONESIA: Biji pepaya (Carica papaya L.) merupakan bagian dari buah pepaya yang diketahui memiliki berbagai khasiat bagi kesehatan tubuh manusia karena mengandung banyak senyawa polifenol salah satunya adalah Alkaloid. Tujuan dilakukannya penelitian ini untuk mengetahui tingkat toksisitas fraksi alkaloid dan isolatnya pada biji pepaya (Carica papaya L.) terhadap larva udang Artemia salina L. dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Ekstraksi senyawa aktif dari serbuk biji pepaya dilakukan dengan metode ultrasonik dengan pelarut pelarut kloroform. Kemudian dilakukan penarikan senyawa alkaloid dengan fraksinasi menggunakan pelarut etil asetat. Pemisahan senyawa aktif dilakukan dengan kromatografi lapis tipis preparatif (KLTP) menggunakan eluen metanol : kloroform (1 : 9). Hasil fraksi etil asetat dan isolat hasil KLTP diuji toksisitas menggunakan metode BSLT pada Artemia salina L. Jenis-jenis senyawa alkaloid dan kelimpahannya akan diidentifikasi dengan instrumen LC-MS. Ekstrak kloroform didapat sebanyak 4,4945 gram dengan persen yied yang diperoleh adalah 22,4725%. Ekstrak kloroform ke dengan etil asetat dan didapat berat rendemen 0,2792 gram dengan persen yield yaitu 6,212%. Fraksi etil asetat ini dilakukan KLTP dan didapat isolat 1 dan isolat 2. Kemudian fraksi etil asetat, isolat 1, dan isolat 2 diuji toksisitas dengan nilai LC50 berturut-turut adalah 5,152 ppm, 5,394 ppm, dan 6,008 ppm. Identifikasi isolat 1 hasil KLTP dilakukan dengan instrumen LC-MS/MS menunjukkan adanya keberadaan senyawa Alkaloid dengan % area kelimpahan sebesar 73,9%. Dalam penelitian ini perlu dilakukan fraksinasi berulang dan KLTP berulang dengan cara isolat yang didapat dipisahkan kembali menggunakan metode lain untuk mengurangi senyawa non-alkaloid dalam sampel. Selanjutnya dapat dilakukan penelitian lanjutan yang mengembangkan sifat toksisitas isolat alkaloid pada biji pepaya agar bisa dimanfaatkan secara maksimal. ENGLISH: Papaya seeds (Carica papaya L.) are part of papaya fruit that well known of its benefits for human body because it contains numerous polyphenolic compounds, one of them is Alkaloid. The purpose of this study is determine the level of toxicity of alkaloid fraction from papaya seeds (Carica papaya L.) to Artemia salina L shrimp larvae using the Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) methode. Extraction of active compounds from the powder of papaya seeds was carried out by ultrasonic methode with chloroform. After that, alkaloid will be fractinated by ethyl acetate. Partition of active compounds was carried out by preparative thin layer chromatography (TLC) using eluent of methanol : chloroform (1 : 9) as a mixing solvent. The result of isolates are tested of it’s toxicity using the BSLT methode on Artemia salina L. The allegation of alkaloid compund will be identified by LC-MS. The chloroformic extract obtained 4.4945 and the percent yield is 22.4725%. The chloroformic extract fractionated with ethyl acetate and obtained weight of 0.2792 grams with a percent yield is 6.212%. The ethyl acetate fraction carried out by P-TLC and obtained isolates 1 and 2. Then, the ethyl acetate fraction, isolate 1, and isolate 2 tested for toxicity value with LC50 are 5.152 ppm, 5.394 ppm, and 6.008 ppm. Identification of isolate 1 from P-TLC using LC-MS/MS instrument, produced alkaloid compounds with % area of Alkaloid is 73.9%. In this research, it is necessary to repeated fractionation and repeated P-TLC by separating the isolates using other methods to reduce non-alkaloid compounds in the sample. Furthermore, the next research can be carried out that develops the toxicity properties of the alkaloid isolates in papaya seeds to be utilized optimally. ARABIC: بذور البابايا (Carica papaya L.) هي جزء من فاكهة البابايا المعروفة بفوائدها الصحية المختلفة لجسم الإنسان لاحتوائها على العديد من مركبات البوليفينول، أحدها القلويات. الهدف من هذا البحث هو تحديد مستوى سمية الجزء القلوي وعزلاته في بذور البابايا (Carica papaya L.) ليرقة الجمبري Artemia salina L. بطريقة اختبار فتق الأرتيميا (BSLT). أما استخلاص المركبات الفعالة من مسحوق بذور البابايا بطريقة الصوت العالي مع مذيب الكلوروفورم. ثم استخلصت الباحثة المركبات القلوية عن التجزئة باستخدام مذيب أسيتات الإيثيل. وأما فصل المركبات النشطة عن طريق الكروماتوغرافي للطبقة الرقيقة (TLC) باستخدام الميثانول: الكلوروفورم (١: ٩). ونتائج إجراءات جزء أسيتات الإيثيل والعزلات من KLTP باستخدام طريقة BSLT على Artemia salina L. ثم تعرفت الباحثة أنواع المركبات القلوية ووفرة هذه المركبات باستخدام أداة LC-MS. حصل على مستخلص الكلوروفورم بقدر٤٩٤٥,٤ غرام مع نسبة إنتاجية التي حصل عليها ٤٧٢٥,٢٢%. ثم جزأ مستخلص الكلوروفورم باستخدام أسيتات الإيثيل وحصل على الوزن الحميد قدره ٢٧٩٢,٠ غرام مع نسبة إنتاجية قدرها٢١٢,٦%. أما إجراء جزء أسيتات الإيثيل بواسطة KLTP حصلت على العزل 1 و العزل 2. ثم أجري جزء أسيتات الإيثيل والعزل 1 والعزل 2 من أجل السمية باستخدام قيم LC50 االمستمر هي١٥٢,٥ ppm و٣٩٤,٥ ppm و٠۰۸,٦ ppm. إن أما تحديد العزلة 1 الناتجة عن KLTP الذي أجرأه باستخدام أداة LC-MS/MS يدل على وجود مركبات قلويد بقدر المائوية تبلغ إلى ٧٣.9%. تحتاج الباحثة في هذا البحث إجراء تجزئة متكررة و KLTP المتكرر بفصل العزلات باستخدام طرق أخرى لتقليل المركبات غير القلوية في العينة. وللباحثن الأخرى يمكن إجراء المزيد من الأبحاث لتطوير خصائص السمية لعزلات قلويد في بذور البابايا بحيث لأخذ الاستفادة أكثر منه