Cryopreservation of dorada semen (Brycon sinuensis) with different cryoprotectants at two percentages of inclusion

La criopreservación permite la conservación de recursos genéticos de peces en peligro de extinción y mejora procesos reproductivos en cautiverio. El objetivo del estudio fue evaluar semen de dorada con tres crioprotectores internos a dos porcentajes de inclusión. Se utilizaron reproductores en fase espermiación (n=12), inducidos con 5 mg de extracto hipofisario de carpa/Kg. Seis horas después el semen fresco (SF) fue colectado y diluido en soluciones crioprotectores compuesta por glucosa 6%, yema de huevo 12% y los crioprotectores dimetilsulfóxido (DMSO), dimetilacetamida (DMA) y etilenglicol (EG) a porcentajes de inclusión de 5 y 10%; luego empacado en pajillas de 0.5 mL y congelado con vapores de nitrógeno. El semen fue descongelado quince días después en baño serológico. La calidad del SF, precongelado (SP) y descongelado (SD) fue evaluada con el software SCA® (Sperm Class Analyzer). Fue evaluada la movilidad total (Mt), tipos de movilidad, velocidades, progresividad total y concentración espermática. En SD se estimaron los daños en membrana espermática (D-Mem), mitocondria (D-Mit) y fragmentación de DNA (F-DNA) mediante citometría de flujo. La Mt del SF fue de 97.0±7.0%, en SP fue de 82.5±17.9% y en SD de 45.4±13.6%; siendo mayor cuando fue tratado con DMSO10% (p<0.05). En SD los D-Mem oscilaron de 62.1±18.8% (DMA 5%) y 49.89.8% (DMSO 5%); los D-Mit de 59.4±14.8% (DMA5%) a 83.4±4.2% (DMSO10%) y F-DNA entre 9.5±14.0% (EG10%) y 1.6±0.2% (DMA10%) (p>0.05). Los resultados obtenidos permiten inferir que los crioprotectores evaluados incluidos a 5 y 10%, son una alternativa viable para la crioconservación de semen de dorada.Cryopreservation allows the conservation of genetic resources of fish in danger of extinction and improves reproductive processes in captivity. This research aimed to evaluate semen from dorada with three cryoprotectants at two inclusionpercentages. Spermation phase breeding males (n=12) were used, induced with 5 mg of carp pituitary extract/Kg. Six hours later, fresh semen (SF) was collected and diluted in cryoprotectant solutions composed of glucose 6%, egg yolk 12% and thecryoprotectants dimethylsulfoxide (DMSO), dimethylacetamide (DMA) and ethylene glycol (EG) at inclusion percentages of 5 and 10%; then packed in 0.5 mL straws and frozen with nitrogen vapors. The semen was thawed fifteen days later in a serological bath. The quality of the FS, pre-frozen (PS) and thawed (TS) was evaluated with the support of the SCA® software (Sperm Class Analyzer). Total motility (Mt), types of motility, velocities, total progressivity and sperm concentration were evaluated. Damage to the sperm membrane (D-Mem), mitochondria (D-Mit) and DNA fragmentation (F-DNA) were measured by flow cytometry in TS. The Mt of SF was 97.0±7.0%, in SP it was 82.5±17.9% and in SD it was 45.413.6%, being higher when treated with DMSO10% (p <0.05). In TS, the D-Mem ranged from 62.1±18.8% (DMA 5%) to 49.89.8% (DMSO 5%), the D-Mit from 59.4±14.8% (DMA 5%) to 83.4±4.2% (DMSO 10%) and F-DNA between 9.5±14.0% (EG10%) and 1.6±0.2% (DMA10%) (p>0.05). The results allow us to infer that the evaluated cryoprotectants, including 5 and 10%, are a viable alternative forthe cryopreservation of dorada sperm