Evaluation of nematicidal potential of comercial formulations based on Bacillus spp

Animais da raça Gir no Brasil e no mundo sofrem frequentemente com otite parasitária externa. Esta doença é causada principalmente por nematoides do gênero Metarhabditis spp. e pode causar desconforto, secreções purulentas, sinais neurológicos e morte dos animais, além de queda no desempenho produtivo e reprodutivo no rebanho. Diferentes bactérias do gênero Bacillus já possuem ação consolidada no controle de pragas agrícolas e algumas já são comercialmente utilizadas. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia de produtos comerciais A, B e C, compostos por Bacillus spp. no controle in vitro de Meterhabditis sp., além dos modelos Panagrellus redivivus e Caenorhabditis elegans. O produto A é constituído por Bacillus subtilis QST-713, o produto B de B. thuringiensis CCT 1306 e o produto C trata-se de uma associação entre B. subtilis CCTB 04, B. pumilus CCTB 05 e Bacillus amyloliquefaciens CCTB 09. Quando testados contra C. elegans, cepa N2, o produto A apresentou DL50 mínima de 0,5 ml/L, dentro de 24h e manteve-se altamente eficaz mesmo quando autoclavado ou diluído em PBS a 5% da concentração original. O produto B apresentou DL50 de 3,1 ml/L, dentro de 24h e manteve a grande eficácia quando autoclavado diluído em concentrações a partir de 10%. O produto C apresentou DL50 169 ml/L, obtida em 48h, tempo máximo que delongou este experimento e apresentou alta eficácia apenas quando foi testado sem ser diluído, autoclavado ou não. Já nos ensaios com P. redivivus, o produto A apresentou DL50 mínima de 47 ml/L, observada em 96h e obteve alta eficácia a partir de quando diluído a 25% e mesmo quando autoclavado em concentração máxima. O produto B, obteve DL50 mínima de 165 ml/L, obtida em 120h, tempo máximo que delongou este experimento, e manteve alta eficácia a partir de quando diluído a 50% e quando autoclavado em concentração máxima. O produto C não obteve eficácia significativa. No caso de Metarhabditis sp., o produto A apresentou DL50 mínima de 5 ml/L em apenas 24h e permaneceu com máxima eficácia a partir da diluição de 5%, a menor testada, e após autoclavado em concentração máxima. O produto B apresentou DL50 mínima de 2 ml/L em 24h e também apresentou máxima eficácia a partir da diluição de 5% e no produto autoclavado em concentração máxima. O produto C também não apresentou eficácia significativa no caso de Metarhabditis spp. A partir destes resultados, podemos concluir que os produtos A e B podem ser considerados eficientes nematicidas mesmo diluídos ou autoclavados, não só contra Metarhabditis spp., mas também contra outras espécies de nematoides. Apesar do produto C não ter se mostrado eficaz contra Metarhabditis sp. e ter se mostrado, em geral, com menor potencial nematicida, ele não pode ser completamente descartado para avaliação de nematotoxicidade em outras espécies de importância veterinária. Palavras-chave: Controle biológico. Nematoides. Bacillus spp. Metarhabditis spp.Gyr breed in Brazil and around the world often suffer from external parasitic otitis. This disease is mainly caused by nematodes of the genus Metarhabditis spp. and it can cause discomfort, purulent secretions, neurological signs and death of animals, besides a drop in productive and reproductive performance in the herd. The bacteria genre Bacillus are widely used in biological control, as they are highly effective in controlling different agricultural pests. The aim of this study was to evaluate the effectiveness of commercial products A, B and C compounds of Bacillus sp. in the in vitro control of Meterhabditis sp., in addition to the models Panagrellus redivivus and Caenorhabditis elegans. Product A consisted of Bacillus subtilis QST-713, product B of B. thuringiensis CCT 1306 and product C was an association between B. subtilis CCTB 04, B. pumilus CCTB 05 and Bacillus amyloliquefaciens CCTB 09. When tested against C. elegans, strain N2, product A had a minimum LD50 of 0.5 ml/L within 24h and remained highly effective even when autoclaved or diluted in PBS at 5% of the original concentration. Product B had a LD50 of 3,1 ml/L within 24 hours and maintained its great efficacy when diluted in concentrations from 10% and after autoclaving. Product C presented DL50 169 ml/L, obtained in 48h, the maximum time that prolonged this experiment and showed high efficacy only when tested undiluted or after autoclaving. In the experiment with P. redivivus, product A had a minimum LD50 of 47 ml/L, observed in 96h and obtained high efficacy from when diluted to 25% and even when autoclaved at maximum concentration. Product B obtained a minimum DL50 of 165 ml/L, obtained in 120h, the maximum time that prolonged this experiment, and maintained high efficacy from when diluted to 50% and when autoclaved at maximum concentration. Product C did not achieve significant efficacy. In the case of Metarhabditis spp., product A had a minimum LD50 of 5 ml/L in just 24 hours and remained with maximum effectiveness from the 5% dilution, the smallest tested, and after autoclaving at maximum concentration. Product B had a minimum DL50 of 2ml/L in 24h and also showed maximum efficacy from a 5% dilution and in the autoclaved product at maximum concentration. Product C also did not show significant efficacy in the case of Metarhabditis spp. From these results we can conclude that products A and B can be considered efficient nematicides even diluted or autoclaved, not only against Metarhabditis sp., but also against other nematode species. Although product C has not been shown to be effective against Metarhabditis spp. and having shown, in general, to have less nematicidal potential, it cannot be completely ruled out for evaluation of nematotoxicity in other species of veterinary importance. Keywords: Biological control. Nematodes. Bacillus spp. Metarhabditis spp.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio