Ekstrak Kasar Mikroalga Laut Spirulina Sp Sebagai Inducer Β-Aktin Untuk Anti Inflamasi Pada Ikan Kerapu Cantang (Epinephelus Sp) Yang Diinfeksi Viral Nervous Necrosis (Vnn)

Ikan dari subfamili Epinephalinae (kerapu) memiliki nilai ekonomi yang cukup besar di daerah tropis dan subtropis. Secara khusus, ikan hidup sangat berharga di Asia Tenggara (Sadovy et al., 2008). Tingginya harga ini menyebabkan peningkatan budidaya. Upaya budidaya biasanya terkendala oleh berbagai penyakit dan virus. Kendala pada kelompok Epinephelus (Kerapu) yang dibudidayakan di Indonesia adalah terbatasnya benih akibat infeksi virus yang menyebabkan kematian hingga 80%, bahkan bisa sampai 100% (Yanuhar et al., 2012). Kematian benih tersebut disebabkan karena serangan Viral Nervous Necrosis. VNN menyebabkan retinopati dan ensefalopati yang memiliki jangkauan inang yang luas (Yuasa et al., 2000). Pemanfaatan mikroalga sudah banyak dikembangkan, terutama dalam bidang farmakologi yang nantinya digunakan sebagai antiviral. Beberapa penelitian menjelaskan bahwa ekstrak dari mikroalga telah menunjukkan aktivitas antiviral (Kok et al., 2011), kemudian fraksi polisakarida dari mikroalga juga berpotensi untuk menghambat produksi retrovirus (Talyshinsky et al., 2002). Salah satu mikroalga yang dapat dimanfaatkan yaitu Spirulina (Arthrospira). Pemanfaatan Spirulina tidak hanya mampu mendukung pertumbuhan ikan. Beberapa penelitian juga menyebutkan mikroalga Spirulina dapat digunakan dalam manajemen kesehatan ikan karena mikroalga ini mengandung protein, vitamin, dan mineral yang tinggi serta senyawa aktif biologis seperti pigmen, diantaranya chlorophyll a dan β-carotene (Bhat & Madyastha, 2000) yang dapat dimanfaatkan sebagai antiviral, antioksidan, dan antimikroba. Kim et al., (2001) juga menambahkan bahwa karotenoid yang terdapat pada Spirulina juga dapat digunakan sebagai inducer untuk peningkatan sistem imun. Selain itu fragmen pigmen protein dari mikroalga dapat dimanfaatkan untuk anti-inflamasi pada saat virus ssRNA menyerang ikan kerapu (Yanuhar, 2015). Sitoskeleton berperan penting dalam menghadapi serangan virus atau penyakit. Pada dasarnya sitoskeleton teridiri dari tiga komponenen yaitu mikrotubul, aktin filamen, dan intermediet filamen. Aktin sendiri merupakan protein, dan paling banyak ditemukan pada sel eukariotik serta memiliki peran penting dalam interaksi protein. Secara umum aktin sitoskeleton yang terdapat pada organisme ada tiga macam yaitu α-aktin, γ-aktin, dan β-aktin (Artman et al., 2014). β-aktin dapat dikatakan sebagai housekeeping gen, dimana gen atau protein ini dibutuhkan sebagai dasar dalam pemeliharaan seluler. β-aktin berperan sebagai kunci dalam mempertahankan struktur sitoskeletal, sitokinesis, endositosis, motilitas sel, dan adhesi sel (Ayscough, 2004). β-aktin juga termasuk salah satu gen yang dapat mentranskripsi kode, yang mana digunakan sebagai dasar induksi untuk ekspresi gen (Linzer dan Nathans, 1983). Karena β-aktin memiliki tingkat ekspresi lebih stabil dibandingkan kontrol internal lainnya, maka β-aktin merupakan salah satu referensi gen paling baik digunakan sebagai ekspresi gen dalam meningkatkan respon imun yang nantinya akan menghambat proses ix transkripsi virus (VNN) di dalam sel. Dengan demikian tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui manfaat ekstrak kasar mikroalga laut Spirulina sp terhadap ekspresi β-aktin (sebagai inducer) pada ikan kerapu cantang yang diinfeksi VNN. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekperimental. Pengamatan dilakukan pada perlakuan (a) ikan kontrol (ikan tanpa perlakuan), (b) ikan dengan pemberian ekstrak Spirulina sp, (c) ikan dengan pemberian VNN, dan (d) ikan dengan pemberian Spirulina sp dan pada hari ke-5 diinfeksikan VNN. Metode analisa yang digunakan adalah PCR, nested RT-PCR, IHC, dan ANOVA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kasar Spirulina sp mengandung senyawa bioaktif seperti flavonoid, alkaloid, terpenoid, tanin dan saponin. Hasil uji in vivo menunjukkan bahwa pemberian ekstrak kasar Spirulina sp berpengaruh terhadap ekspresi β-aktin. Hasil kuantifikasi PCR (β-aktin) dan nested RT-PCR (VNN) menunjukkan kemunculan band, yakni terdeteksi pada 150 bp untuk β-aktin dan terdeteksi 294 bp untuk VNN. Berdasarkan hasil rata-rata secara kuantitatif meggunakan analisis ImmunoRatio persentase kemunculan β-aktin pada ikan kontrol sebesar 24,5%, pada perlakuan (S1) persentase kemunculan β-aktin 57%, pada perlakuan (S2) persentase kemunculan β-aktin 63,3%, pada perlakuan (S3) persentase kemunculan β-aktin 63,5%, pada perlakuan (V) persentase kemunculan β-aktin 63,6%, pada perlakuan (SV1) persentase kemunculan β-aktin 62,7%, pada perlakuan (SV2) persentase kemunculan β-aktin 64,7%, dan pada perlakuan (SV3) persentase kemunculan β-aktin 63,6%. Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa kandungan senyawa aktif dari ekstrak kasar Spirulina sp mampu berperan sebagai inducer dan dapat meningkatkan ekspresi β-aktin, hal ini terkait dengan peran dan fungsi β-aktin sebagai housekeeping gen dimana peningkatan ekspresi β-aktin akan meningkatkan sistem imun pada ikan terutama dalam menghadapi serangan virus ssRNA positf (VNN)