Génération et mécanismes d'action anti-tumorale d'effecteurs lymphocytaires T CD4+ dans les lymphomes B malins     

The importance of CD4+ T lymphocytes in anti-tumor immune responses has been increasingly highlighted in the course of those last ten years. We have studied their function in B-cell non-Hodgkin lymphomas. In the first part of this thesis, we have studied a model derived from fresh splenic cells of a patient with a splenic marginal-zone B cell lymphoma. We have been able to demonstrate a functional effect of reactive CD4+ T lymphocytes onto autologous malignant B cells, that is, the CD4+ T cell-induced differentiation of the autologous malignant B cells into plasmocytes. We have then studied another aspect of the functionality of reactive CD4+ T cells towards a follicular B cell lymphoma line obtained in our laboratory. Total autologous CD4+ T cells from the peripheral blood lymphocytes were cytotoxic to autologous malignant B cells, as well as normal lymphoblastic cells. However, cloning of the reactive CD4+ T cells further identified three clones with specific cytotoxicity against malignant cells. All three clones possess an identical TCR Vb17-Db1-Jb1.2, are HLA-DP restricted, and they perform cytolysis through a classical perforin/granzyme pathway. These results allow us concluding that CD4+ T cells can induce a direct anti-tumor effect with multifarious mechanisms. This work provides novel arguments in favor of the pivotal role of CD4+ T lymphocytes in the anti-tumor immunity, as well as a methodology for further identification of tumor antigens in B cell lymphomas. Le rôle des lymphocytes T CD4+ dans la réponse immune anti-tumorale s'est révélé être de plus en plus important au cours de ces dix dernières années. Nous nous sommes attachés à l'étude de leur fonction dans les lymphomes malins non hodgkiniens de type B. Dans la première partie de ce travail de thèse, nous avons étudié un modèle à partir des cellules fraîches splénique d'un patient porteur d'un lymphome B splénique de la zone marginale. Nous avons pu déterminer un effet fonctionnel des lymphocytes T CD4+ réactifs par rapport aux cellules malignes B autologues. Ces cellules T CD4+ sont capables d'induire une différenciation des lymphocytes B tumoraux en plasmocytes, et cette induction a été dévoilée pour la première fois dans un système cellulaire autologue. Nous avons ensuite étudié la capacité fonctionnelle des lymphocytes T CD4+ réactifs sur une lignée de lymphome B folliculaire obtenue dans notre laboratoire. Nous avons obtenu un effet cytotoxique par les cellules T CD4+ totales autologues venant des lymphocytes du sang périphérique. Cependant, cette cytotoxicité s'est montrée à la fois sur les cellules B malignes et les cellules B normales lymphoblastoïdes. Un clonage a été ensuite réalisé dans le but d'écarter les clones non spécifiques et de trouver des clones T cytotoxiques spécifiques des cellules malignes. Parmi les six clones obtenus, trois sont spécifiques et ils possèdent un TCR identique Vb17-Db1-Jb1.2. Ces clones exercent une cytotoxicité contre les cellules tumorales en reconnaissant l'antigène tumoral présenté par la molécule HLA-II DP et leur mécanisme de lyse correspond à la voie perforine/granzymes. Ces deux résultats nous ont permis de conclure que les cellules T CD4+ peuvent induire un effet direct anti-tumoral avec des mécanismes variés. Ce travail donne de nouveaux arguments concernant le rôle pivot des lymphocytes T CD4+ dans l'immunité anti-tumorale et permet d'envisager l'identification de l'antigène tumoral