Mise en evidence et caractérisation d'une interaction fonctionnelle entre la kinase Aurora-A et la phosphatase PP2A

Mitosis progression is tightly controlled by a succession of enzymatic reactions, includingthose catalyzed by numerous protein kinases and phosphatases. More specifically, the mitoticserine/threonine kinase Aurora-A is required in these processes as it is involved in theregulation of the G2/M transition, centrosome cycle, mitotic spindle and chromosomessegregation. Aurora-A is activated by interacting with other proteins such as TPX2 or AJUBAand its kinase activity is modulated by the phosphorylation at specific sites. Besides, it hasbeen recently shown in vitro that Aurora-A degradation by the proteasome pathway isinduced by the dephosphorylation of a highly conserved residue: serine 51. In this study, wehave shown that the phosphatase PP2A and the kinase Aurora-A are co-localized incentrosomes and are interacting within the same complex. Moreover, the pharmacologicalinhibition of PP2A activity or the inhibition of its expression both led to Aurora-Astabilization in vivo. These results indicate that PP2A controls Aurora-A degradation in vivo.Finally, we confirmed in vivo in mammalian cells that phosphorylation of the S51 residueprevents the degradation of Aurora-A.Le déroulement de la mitose est très étroitement contrôlé par une succession de réactionsenzymatiques en particulier, celles catalysées par de nombreuses protéines kinases etphosphatases. Plus précisément, la sérine/thréonine kinase mitotique Aurora-A est essentielleà ces processus car elle participe à la régulation de la transition G2/M, du cycle descentrosomes, du fuseau mitotique et de la ségrégation des centrosomes. Aurora-A est activéegrâce à son interaction avec d'autres protéines telles que TPX2 et AJUBA et son activitékinase est modulée par la phosphorylation de sites spécifiques. Par ailleurs, il a été récemmentmontré in vitro que la dégradation de Aurora-A par la voie du protéasome est induite par ladéphosphorylation d'un résidu très conservé : la sérine 51. Ceci suggère qu'une phosphataseinduit la protéolyse de Aurora-A par déphosphorylation du résidu S51. Dans cette étude, nousavons montré que la phosphatase PP2A et la kinase Aurora-A sont co-localisées dans lescentrosomes des cellules mammifères et interagissent au sein d'un même complexe. De plus,l'inhibition pharmacologique de l'activité de PP2A ou l'inhibition de son expressionconduisent à stabiliser Aurora-A in vivo. Ces résultats indiquent que PP2A contrôle ladégradation de Aurora-A in vivo. Enfin, Nous avons confirmé in vivo dans des cellulesmammifères que la phosphorylation du résidu S51 protège Aurora-A de la dégradation