Efeito antinociceptivo da maresina-2 em modelos animais de dor pós operatória e neuropática trigeminal

Orientadora: Profa. Dra. Juliana Geremias ChichorroDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa : Curitiba, 23/09/2021Inclui referências: p. 48-56Resumo: A dor é um sintoma comum associado a distúrbios que envolvem as estruturas orofaciais. A maioria das condições dolorosas orofaciais agudas são facilmente reconhecidas, mas o tratamento farmacológico pode ser limitado pelos eventos adversos dos fármacos atualmente disponíveis e/ou pelas características dos pacientes. Além disso, as condições de dor orofacial crônica representam desafios clínicos tanto em termos de diagnóstico quanto de tratamento. Sendo assim, torna-se importante a busca de novas alternativas terapêuticas, as quais contornem as limitações existentes. Nesse sentido, evidenciam-se os lipídeos pró-resolução especializados (do inglês, SPMs, specialized pro-resolving mediators) como uma alternativa promissora de tratamento no controle do processo inflamatório e de outras doenças. Esses mediadores químicos endógenos são biossintetizados na fase de resolução da inflamação, e agem modulando a resposta imune do indivíduo ao interagir com receptores acoplados a proteína G presentes em células de defesa e de neurônios. Além de seus efeitos anti-inflamatórios e pró-resolução, há evidências crescentes de que os SPMs podem atuar reduzindo a severidade de outras condições patológicas, entre elas doenças degenerativas, depressão, infecções, dores inflamatórias e crônicas. Em relação ao seu potencial analgésico, foram relatados potentes e prolongados efeitos antialodínicos e antihiperalgésicos para alguns desses lipídeos, em especial para a maresina-1 (MaR-1). Contudo, embora semelhantes quimicamente, não se encontram estudos que descrevam esses efeitos também para a maresina-2 (MaR-2). O presente trabalho teve como objetivo investigar o potencial antinociceptivo da Maresina-2 (MaR-2) em modelos de dor orofacial. O teste de formalina foi realizado em ratos de acordo com trabalhos anteriores realizados por nosso grupo, com o objetivo de obter um screening do efeito analgésico da MaR-2. A cirurgia de incisão intraoral (INC) em ratos e a constrição do nervo infraorbital em ratos e camundongos (CCI-ION) foram realizadas conforme publicações anteriores do nosso grupo. O tratamento com Maresina-2 (10 ng) foi feito em dias alternados após o procedimento cirúrgico, totalizando 2 injeções no modelo de INC e 4 injeções no modelo de CCI-ION, sempre via medular subaracnóidea. Foram avaliadas a hiperalgesia térmica e mecânica em dias alternados, até 2 dias após o término dos tratamentos. A atividade neuronal foi avaliada através de imunofluorescência para c- Fos e CGRP em camundongos. Uma única injeção de MaR-2 causou redução significativa do grooming facial nas fases I e II do teste de formalina orofacial em ratos. Injeções repetidas de MaR-2 preveniram o desenvolvimento de hiperalgesia ao calor e hiperalgesia mecânica em um modelo de dor pós-operatória em ratos. Em um modelo de dor neuropática trigeminal (i.e., cirurgia de constrição crônica do nervo infraorbital, CCI-ION), o tratamento repetido com MaR-2 reverteu a hiperalgesia térmica e a hiperalgesia mecânica em ratos e camundongos. A CCI-ION causou aumento de neurônios c-Fos positivos e dos neurônios ativados por CGRP no gânglio trigeminal (TG), que foram restaurados aos níveis basais pelo tratamento repetido com MaR-2. Em conclusão, a MaR-2 tem efeitos analgésicos potentes e de longa duração na dor inflamatória e neuropática de origem orofacial, e a inibição da atividade de neurônios CGRP-positivos no TG pode contribuir para o efeito analgésico da MaR-2.Abstract: Pain is a common symptom associated with disorders involving orofacialstructures. Most acute orofacial painful conditions are easily recognized, butpharmacological treatment may be limited by adverse events of currently availabledrugs and/or patient characteristics. In addition, chronic orofacial pain conditions poseclinical challenges both in terms of diagnosis and treatment. Therefore, it is importantto search for new therapeutic alternatives, which overcome the existing limitations. Inthis sense, specialized pro-resolving lipids (SPMs, specialized pro-resolvingmediators) are evidenced as a promising alternative treatment for the control of theinflammatory process and other diseases. These endogenous chemical mediators arebiosynthesized in the inflammation resolution phase and act by modulating theindividual's immune response by interacting with G protein-coupled receptors presentin defense e is growing evidence that PMS can act to reduce the severity of otherpathological cells and neurons. In addition to their anti-inflammatory and pro-resolutioneffects, therconditions, including degenerative diseases, depression, infections,inflammatory and chronic pain. Regarding its analgesic potential, potent and prolongedanti allodynic and anti hyperalgesic effects have been reported for some of these lipids,especially for maresin-1 (MaR-1). However, although chemically similar, there are nostudies that describe these effects also for maresin-2 (MaR-2). This study aimed toinvestigate the antinociceptive potential of Maresin-2 (MaR-2) in orofacial pain models.The formalin test was performed in rats by previous work carried out by our group, toobtain a screening of the analgesic effect of MaR-2. Intraoral incision surgery (INC) inrats and constriction of the infraorbital nerve in rats and mice (ICC-ION) wereperformed according to previous publications from our group. Treatment with Maresin-2 (10 ng) was performed every other day after the surgical procedure, totaling 2injections in the INC model and 4 injections in the CCI-ION model, always via the spinalcord. Thermal and mechanical hyperalgesia was evaluated on alternate days, up to 2days after the end of treatments. Neuronal activity was evaluated byimmunofluorescence for c-Fos and CGRP in mice. A single MaR-2 injection caused asignificant reduction in facial grooming in phases I and II of the orofacial formalin testin rats. Repeated MaR-2 injections prevented the development of heat hyperalgesiaand mechanical hyperalgesia in a postoperative pain model in rats. In a model oftrigeminal neuropathic pain (i.e., surgery for chronic infraorbital nerve constriction, CCIION),repeated treatment with MaR-2 reversed thermal hyperalgesia and mechanicalhyperalgesia in rats and mice. CCI-ION caused an increase in c-Fos positive neuronsand CGRP-activated neurons in the trigeminal ganglion (TG), which were restored tobaseline levels by repeated treatment with MaR-2. In conclusion, MaR-2 has potentand long-lasting analgesic effects on inflammatory and neuropathic pain of orofacialorigin, and inhibition of the activity of CGRP-positive neurons in TG may contribute tothe analgesic effect of MaR-2