Estudo morfoanatômico, fitoquímico, farmacológico e biológico das partes aéreas de Senecio westermanii Dusén (Asteraceae)

Orientador: Prof. Dr. Obdulio Gomes MiguelCoorientadora: Profa. Dra. Marilis Dallarmi MiguelTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa : Curitiba, 25/05/2018Inclui referências: p.171-197Resumo: A espécie S. werstermanii Dusén (Asteraceae) encontra-se exclusivamente no Brasil nos estados do Paraná e São Paulo na Floresta Atlântica. Para o estudo da espécie foi obtido o extrato bruto (EB) e as frações hexano (FH), clorofórmio (FCL), acetato de etila (FAE) e hidroalcoólica remanescente (FRE). Foi realizado estudo morfoanatômico da folha e caule em lâminas semipermantes, permanentes e MEV. A identificação de compostos ocorreu por espectroscopia de RMN 1H e 13C, DRXM e EDS. Análise da concentração de fenóis totais. Estudo farmacológico de gastroproteção e trânsito gastrointestinal. Avaliação enzimática dos fígados de camundongos para proteína total, ALP, ALT, AST, GST, SOD, CAT e peroxidação lipídica. Na alelopatia foram utilizadas sementes de Allium cepa e na alelopatografia sementes de Lactuca sativa. Para atividade larvicida utilizou-se larvas de Aedes aegypti. Na morfoanatomia as folhas são anfiestomáticas e estômatos anomocítico, com tricomas tectores unisseriados e nervura central com grãos de amido. O caule contêm ductos secretores no parênquima fundamental e presença de compostos fenólicos. Foi identificado a isoquercetina na FAE por RMN 1H e 13C. E os sais NaCl e KCl por DRXM na obtenção do EB e o CaC2O4 por EDS no mesófilo foliar. Para a concentração de fenóis totais a FAE e FRE apresentaram, respectivamente, 504,71 ± 3,80 e 245,96 ± 4,30 mg de EAG/g. Para o estudo farmacológico (10, 30 e 100 mg/kg do EB) a lesão gástrica aguda induzida por etanol foram estatisticamente semelhante ao omeprazol (40 mg/kg) e no ensaio de trânsito gastrointestinal as amostras apresentaram 73%, 96% e 100%, respectivamente, em comparação a metoclopramida. Na análise de toxicidade do fígado dos camundongos observou alterações pela presença de microvesículas de gorduras. Nos ensaios enzimáticos o teor de proteínas totais foram aumentados com 30 e 100 mg/kg de EB. Nos marcadores de toxicidade do fígado a atividade das enzimas ALP e ALT apresentaram alteradas em 100 mg/kg. As enzimas antioxidantes do fígado GST e SOD sofreram alteração em 100 mg/kg. O teor de MDA foi alterado em 30 e 100 mg/kg. Na alelopatia as amostras retardaram o crescimento da radícula de A. cepa. A respiração radicular foi aumentada em todas as concentrações da FCL e FAE. O teor de clorofila total foi reduzido para todas as frações, exceto para FHA. Na alelopatografia para o ensaio enzimático de Lactuca sativa a mistura de esteroides e a FAE, respectivamente, foram as amostras com maior atividade: SOD (0,44 e 0,42 ?g/proteína), POD (0,56 e 0,52 ?mol.tetraguaiacol/min), CAT (0,12 e 0,10 ?mol.H2O2/min). Para o crescimento da radícula e hipocótilo, respectivamente, houve redução de 62% e 56% (mistura de esteroides) e 53% e 48% (FAE). Na morfologia externa das larvas de Aedes aegypti observou o redução das brânquias anais, colapsamento de segmentos abdominais e tórax achatado. Na morfologia interna houve perda de tecido muscular, espessamento da membrana peritrófica e enrugamento do tecido muscular. Apesar da toxicidade ser característica do gênero Senecio, a espécie em estudo deve ser considerada para estudos futuros para identificar possíveis metabólitos secundários responsáveis pelos resultados obtidos.Abstract: The species S. werstermanii Dusén (Asteraceae) is exclusively in Brazil in the states of Paraná and São Paulo in the Atlantic Forest. The crude extract (EB) and hexane (FH), chloroform (FCL), ethyl acetate (FAE) and remaining hydroalcohol (FRE) fractions were obtained for the study of the species. A morphological study of leaf and stem was carried out on semipermeant, permanent slides and SEM. Identification of compounds by 1H and 13C NMR spectroscopy, DRXM and EDS. Analysis of total phenol concentration. Samples were tested against larvae of Aedes aegypti. A morphological study of leaf and stem was carried out through semipermeant and permanent slides and SEM. Pharmacological study of gastroprotection and gastrointestinal transit. Enzymatic evaluation of mice livers for total protein, ALP, ALT, AST, GST, SOD, CAT and lipid peroxidation.In the allelopathy seeds of Allium cepa and allelopathography of seeds of Lactuca sativa were used. For larvicidal activity larvae of Aedes aegypti were used. In the morphoanatomy the leaves are amphistomatic and the anomocytic stomata, with tectonic trichomes unisseria and central vein with starch grains. The stem contains secretory ducts in the fundamental parenchyma and presence of phenolic compounds. Isoquercetin was identified in FAE by 1H and 13C NMR. And the NaCl and KCl salts by DRXM in obtaining EB and CaC2O4 by EDS in leaf mesophyll. For the concentration of total phenols the FAE and FRE presented, respectively, 504.71 ± 3.80 and 245.96 ± 4.30 mg of EAG/g. For the pharmacological study (10, 30 and 100 mg/kg of EB) the acute gastric injury induced by ethanol was statistically similar to omeprazole (40 mg/kg) and in the gastrointestinal transit test the samples presented 73%, 96% and 100%, respectively, compared to metoclopramide. In the analysis of liver toxicity of the mice, it was observed changes in the presence of fat microvesicles. In the enzymatic assays the total protein content was increased with 30 and 100 mg/kg EB. In liver toxicity markers the activity of ALP and ALT enzymes were altered at 100 mg/kg. The antioxidant enzymes of the liver GST and SOD were altered at 100 mg/kg and the MDA content was altered by 30 and 100 mg/kg. In the allelopathy the samples delayed the growth of A. cepa. Root respiration was increased at all concentrations of FCL and FAE. Total chlorophyll content was reduced for all fractions, except for FHA. In the allelopathography for the enzymatic assay of Lactuca sativa the steroid mixture and the FAE, respectively, were the samples with the highest activity: SOD (0.44 and 0.42 ?g/protein), POD (0.56 and 0.52 ?mol.tetraguaiacol/min), CAT (0.12 and 0.10 ?mol.H2O2/min). For the growth of radicle and hypocotyl, respectively, there was a reduction of 62% and 56% (steroid mixture) and 53% and 48% reduction (FAE). In the external morphology of Aedes aegypti larvae, it was observed the reduction of anal gills, collapsing of abdominal segments and flattened thorax. In internal morphology there was loss of muscle tissue, peritrophic membrane thickening and wrinkling of muscle tissue. Although the toxicity is characteristic of the genus Senecio, the species under study should be considered for future studies to identify possible secondary metabolites responsible for the results obtained