Investigation of psychoactive substances in human breast milk samples

Devido às propriedades físico-químicas, uma gama de substâncias psicoativas (lícitas e ilícitas) consumidas por mulheres em período de lactação pode ser transferida da corrente sanguínea para o leite materno, podendo causar prejuízos/efeitos deletérios no desenvolvimento do recém-nascido a curto e longo prazo. Pesquisas revelam a presença de drogas de abuso, como a maconha e a cocaína, em amostras de voluntárias de estudos ou de bancos de leite humano. O leite humano pode ser utilizado como amostra biológica para análises toxicológicas, sendo coletado de forma simples e não invasiva, o que permite avaliar a exposição do lactente a essas substâncias durante a amamentação. Neste trabalho, a presença de substâncias psicoativas em amostras de leite humano foi investigada a partir de um método de precipitação proteica seguida de extração em fase sólida dispersiva para detecção e quantificação de anfetamina, metanfetamina, metilenodioximetanfetamina, nicotina, cotinina, metadona, morfina, cocaína, cocaetileno e benzoilecgonina com análise por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massas. A validação do método foi considerada satisfatória nos parâmetros avaliados. Os limites de detecção dos analitos variaram entre 2-5 ng.mL-1 e o limite de quantificação foi de 5 ng.mL-1 para todos. As curvas de calibração foram lineares na faixa de trabalho de 5 a 500 ng.mL-1 (r > 0,99), utilizando modelos de regressão linear ponderada. O preparo de amostra apresentou recuperação entre 15-86%, precisão intra-dia de 2-19% e inter-dia de 4-19% e exatidão de 96-114%. Após desenvolvimento e validação, o método foi aplicado a 67 amostras de leite materno coletadas no Banco de Leite Humano do Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto, as quais tiveram resultados negativos para todos os analitos investigados.Due to physicochemical properties, several psychoactive licit and illicit compounds consumed by a lactating woman can be transferred from her bloodstream into breast milk, what can cause damage in newborn\'s short- and long-term development. Research shows the presence of drugs of abuse, such as marijuana and cocaine, in samples from surveys\' volunteers or milk bank donations. Human breast milk can be used as a biological matrix for toxicological analysis, being collected in a simple and noninvasive way, what enables the assessment of newborn\'s exposure to those substances. In this study, the presence of psychoactive substances in breast milk samples was investigated with a method of protein precipitation followed by disposable pipette extraction for amphetamine, methamphetamine, methylenedioxymethamphetamine, nicotine, cotinine, methadone, morphine, cocaine, cocaethylene and benzoylecgonine detection and quantification with gas chromatography coupled to mass spectrometry. Method was considered satisfying on evaluated parameters. The limits of detection ranged from 2 to 5 ng.mL-1 and the limit of quantification was 5 ng.mL-1 for all investigated analytes. Calibration curves were linear over a range of 5 -500 ng.mL-1 (r > 0,99), using weighted linear regression. The sample preparation procedure presented recovery between 15-86%, intra-day precision of 2-19% (CV%), inter-day precision of 4-19% (CV%) and accuracy of 94-113%. After its development and validation, this method was applied to 67 breast milk samples collected at the Milk Bank from Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto, which all resulted negative for the investigated analytes