Evaluation of miR-214-3p, miR-150-5p, miR-142-5p, miR-708-5p, miR-34a-5p e miR-139-3p in pediatric adrenocortical tumors

Tumores adrenocorticais (TAC) em crianças são neoplasias raras, frequentemente associadas a mutações do TP53, que em estadios avançados são comumente fatais. A cirurgia ainda é o padrão ouro para tratamento. A classificação e predição de prognóstico dos TACs pediátricos ainda são um desafio. O papel dos microRNAs (miRNA) no desenvolvimento e progressão do câncer tem sido cada vez mais estudado. O objetivo do presente estudo foi analisar e correlacionar a expressão dos miRNAs miR-214-3p, miR-150-5p, miR-142-5p, miR-708-5p, miR-34a-5p e miR-139-3p com características clínicas e biológicas em TACs pediátricos. A expressão dos miRNAs foi analisada em 68 neoplasias adrenais e 10 amostras de tecido adrenal não neoplásico provenientes de crianças com idade inferior a 18 anos. Testes de Mann-Whitney e modelo de regressão de Cox foram usados para estimar a correlação entre os microRNAs e as variáveis clínicas e biológicas. As curvas de Kaplan Meir e teste de log rank foram usados para estimar a sobrevida geral em 5 anos. Valores de expressão maiores que a mediana dos tecidos não neoplásicos foram considerados hiperexpressos. Valores de p 200cm3, >100g e > 200g) em relação aos menores. Tumores com volume maior de 200cm3 também apresentaram uma menor expressão de miR-34a-5p e miR-708-5p. Em tumores com peso maior que 200g em comparação com os menores, os miR-150-5p, miR-142- 5p e miR-708-5p foram hipoexpressos. Ao analisarmos o perfil dos miRNAs em relação a classificação histopatológica de Weiss observamos uma maior expressão do miR-139-3p nos TAC classificados como malignos. Uma expressão maior do miR-150-5p foi observada nos pacientes mais jovens ( 200cm3, > 100g or >200g) miR-214-3p had lower expression in comparison to smaller tumors. In ACT with larger volumes >200 cm3 miR-34a-5p and miR-708-5p were also downregulated. When tumors weighted more than 200g we detected a significant lower expression of miR-150-5p, miR-142-5p and miR-708-5p. For Weiss histopathologic classification we observed an upregulation of miR-139-3p in malignant tumors (Weiss>3). A higher expression of miR-150-5p was observed in young patients (<3 years or < 4 years) and in patients that had better prognosis. Patients with overexpressed miR-150-5p had better OS (92.9% vs 68.7%, p=0.028). Excluding patients classified as stage 1 of IPACTR2 or modified Sandrini classifications a more significant difference in OS (81.3% vs 30%, p=0.015 e 80% vs 36.4%, p= 0,042, respectively) and EFS (75% vs 20%, p=0.009 e 73.3% vs 27.3%, p=0.032, respectively) was found. To evaluate miR-150-5p effect in commonly ACT related genes we proceed the knockdown of miR-150-5p in human adrenal NCI-H295A cells. After the knockdown we observed down regulation in NOTCH1, NOTCH2 and CTNNB1 expression and upregulation in DKK3 expression. Our results suggests that miRNAs are important in ACT, specially miR-150-5p that showed a potential in defining patients with better prognosis