Development of 3D spheroid cell culture derived from tumor cell lines suitable for photodynamic therapy research

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Lenka Brieslingerová Supervisor: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Title od diploma thesis: Development of 3D spheroid cell culture derived from tumor cell lines suitable for photodynamic therapy research Growing number of tumorous diseases worldwide is urging great effort to make anticancer treatment more effective. Conventional testing of newly developed drugs is performed on tumor cell cultures growing in a monolayer. However, the use of 3D spheroid models provides a more appropriate method of testing, as these models are able to better mimic the in vivo properties of tumors and thus provide a more realistic response to administered drugs. In addition to testing new cytostatics, 3D spheroid models can also be used as tumor models to study the effect of photodynamic therapy (PDT), although this model is still not widely utilized in the field of PDT research. PDT is an alternative and minimally invasive treatment method used not only to treat tumors. It utilises a photosensitizer (PS), molecular oxygen (3O2) and light to form reactive oxygen species (ROS), consequently damaging tumor tissue. This diploma thesis deals with the production of 3D spheroid cell cultures from the HeLa cell line, which...Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Lenka Brieslingerová Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj 3D sférických buněčných modelů odvozených od nádorových buněčných kultur vhodných pro studium fotodynamické terapie Vzhledem k celosvětově narůstajícímu počtu nádorových onemocnění je stále velká snaha zefektivnit jejich léčbu. Běžně je testování nově vyvíjených léčiv prováděno na kulturách nádorových buněk rostoucích v monovrstvě. Použití 3D sféroidních modelů však poskytuje vhodnější způsob testování, jelikož tyto modely dokáží lépe napodobit vlastnosti in vivo nádorů a poskytnout tak reálnější odezvu na podaná léčiva. 3D sféroidní modely mohou být využity kromě testování nových cytostatik také jako nádorové modely pro studium účinku fotodynamické terapie (PDT), ač tento model stále není v tomto oboru příliš rozšířen. PDT je alternativní minimálně invazivní léčebná metoda nejen pro nádorová onemocnění. Využívá fotosenzitizéru (PS), molekulárního kyslíku (3 O2) a světla k tvorbě reaktivních forem kyslíku (ROS), které následně poškozují nádorovou tkáň. Tato práce se zabývala zhotovením 3D sféroidních buněčných kultur z HeLa buněčné linie, které byly následně použity k dalším pokusům, včetně PDT. Sféroidy byly...Katedra biochemických vědDepartment of Biochemical SciencesFaculty of Pharmacy in Hradec KrálovéFarmaceutická fakulta v Hradci Králov