Aktywność proteolityczna szczepów Bacillus cereus

The aim of conducted research was to assess proteolytic activity of Bacillus cereus strains, depending on the source of proteins in a growth medium and temperature. Two Bacillus cereus strains: G10 and A96, isolated from soil and water respectively, were applied in the research. The source of carbon in the growth media was provided by the protein substrates as follows: albumin, casein and skimmed milk. The temperature ranged between 30 and 60ºC. The proteolytic activity was determined with the use of a spectrophotometric method with 2% casein as a substrate, at the wavelength λ = 560 nm. In the experiment, the proteolytic activity depended on the type of protein substrate in the growth medium and the temperature. B. cereus G10 strain showed the highest activity at 30ºC in case of albumin and the lowest in the growth medium with skimmed milk. At temperatures 40 and 50ºC the most favourable medium was with an addition of skimmed milk and the least favourable with albumin. Proteolytic activity was not recorded when the temperature was the highest and the medium contained skimmed milk, whereas at the same temperature the lowest activity was noted again in the medium with albumin. Bacillus cereus A96 strain showed, however, different activity. The highest activity was noted at tempertaures of 30 and 50ºC in the medium with skimmed milk, and the lowest in the medium with casein. The opposite was noted at 40ºC, as no proteolytic activity was recorded in the presence of skimmed milk while the highest was recorded in the presence of casein. When analysing the influence of the temperature on the proteolytic activity, it has been noted that strains of Bacillus cereus are the most vigorous at the temperature of 30 and 40ºC, and the least vigorous at 50 and 60ºC. The highest recorded values for the screened strains have been obtained at 30 and 40ºC in the medium with skimmed milk.Celem podjętych badań była ocena aktywności proteolitycznej szczepów Bacillus cereus w zależności od źródła białka zawartego w podłożu oraz temperatury. Do badań wykorzystano 2 szczepy Bacillus cereus G10 oraz A96 wyizolowane odpowiednio z gleby i wody. Źródłem węgla w pożywkach były substraty białkowe: albumina, kazeina oraz odtłuszczone mleko. Aktywność proteolityczną oznaczono w zakresie temperatur od 30 do 60ºC. Oznaczenia aktywności proteolitycznej przeprowadzono metodą spektrofotometryczną, używając jako substratu 2% kazeiny po 10-minutowej inkubacji, przy długości fali λ = 560 nm. W przeprowadzonym doświadczeniu aktywność proteolityczna uzależniona była od rodzaju substancji białkowej zawartej w podłożu oraz temperatury. I tak, badany szczep B. cereus G10 w temperaturze 30ºC największą aktywność proteolityczną wykazywał w obecności albuminy, a najniższą w obecności odtłuszczonego mleka. W temperaturach 40 i 50ºC najkorzystniejszym podłożem okazało się podłoże zawierające odtłuszczone mleko, a najmniej korzystne zawierające albuminę. W najwyższej temperaturze nie stwierdzono aktywności proteolitycznej w obecności odtłuszczonego mleka, zaś najniższą aktywność odnotowano ponownie w środowisku albuminy. Z kolei drugi z badanych szczepów, Bacillus cereus A96, charakteryzował się odmienną aktywnością. W temperaturach 30 i 50ºC najwyższą aktywność proteolityczną odnotowano w podłożu zawierającym odtłuszczone mleko, a najniższą w środowisku kazeiny. Natomiast w temperaturze 40ºC zaobserwowano odwrotną sytuację, gdyż nie stwierdzono aktywności proteolitycznej w obecności odtłuszczonego mleka, a najwyższą aktywność uzyskano w obecności kazeiny. Analizując wpływ temperatury na aktywność proteolityczną, stwierdzono, iż największą aktywność badane szczepy Bacillus cereus wykazują w temperaturach 30 i 40ºC, a najmniejszą w 50 i 60ºC. Najwyższe wartości dla badanych szczepów uzyskano w temperaturach 30 i 40ºC na podłożu z dodatkiem odtłuszczonego mleka