Caracterización de Iduronato-2sulfato Sulfatasa (IDS) humana recombinante producida en E.coli

La terapia de reemplazo enzimático ha tenido importancia como tratamiento en el síndrome de Hunter en los últimos años. Dicha estrategia se ha desarrollado empleando células de mamífero como plataforma de producción de proteínas recombinantes que posteriormente son suministradas a los pacientes con la deficiencia enzimática. A partir de esto se ha intentado producir la enzima en diferentes sistemas de producción como E.coli por sus ventajas como sistema de expresión. Sin embargo además de la producción es necesario caracterizarla para estudiar condiciones de estabilidad de la proteína recombinante. En este trabajo se tuvo como objetivo caracterizar la enzima recombinante humana iduronato-2-sulfato sulfatasa (IDS) producida en E coli. Para esto se evaluó la producción de la enzima en diferentes cepas de E.coli a diferentes escalas de cultivo. Posterior a esto se caracterizó la enzima purificada para analizar su estabilidad en diferentes condiciones de pH y temperatura. Los resultados de este proyecto representan información valiosa en el desarrollo de una posible plataforma de producción de proteínas recombinantes para uso en terapia de reemplazo enzimático en enfermedad de Hunter.Enzyme replacement therapy has been important as treatment for the Hunter syndrome in recent years. This strategy has been developed using mammalian cells as a production platform for recombinant proteins, which are then supplied to patients with the enzyme deficiency. It has been attempted to produce the enzyme in different production systems due to its advantages such as E.coli expression system. Besides the production, it is necessary to study different conditions of the recombinant protein in order to characterize its stability. This work was aimed to characterize the recombinant human enzyme iduronate-2-sulfate sulfatase (IDS) produced in E coli. For the production of this enzyme in different strains of E.coli culture at different levels was evaluated. Following this the purified enzyme was characterized to analyze its stability under different conditions of pH and temperature. The results of this project represent valuable information on the development of a possible platform for production of recombinant proteins for use in enzyme replacement therapy for Hunter disease.Microbiólogo (a) IndustrialPregrad