Chromatographic method for testing the photostability of nadifloxacin, development and validation

Nadyfloksacyna należy do drugiej generacji fluorochinolonów. Swoją przeciwbakteryjną aktywność uzyskuje w mechanizmie blokady topoizomerazy II i IV skutkując zahamowaniem syntezy DNA i obumarciem komórki bakterii. Stosowana jest głównie w zewnętrznych postaciach leków jednoskładnikowych i złożonych ze wskazaniem infekcji skóry i tkanek miękkich o etiologii bakteryjnej.W niniejszej pracy skupiono się na opracowaniu metody chromatografii cienkowarstwowej z detekcją densytometryczną, oraz jej walidacji, dzięki której można oznaczać nadyfloksacynę obok produktów jej fotodegradacji.Fazę stacjonarną stanowiły płytki chromatograficzne HPTLC LiChrospher a fazę ruchomą mieszanina o składzie: dichlorometan – etanol – toluen – amoniak 25% – n-butanol – woda (6:6:2:1,8:3:1 v/v/v/v/v/v) na drodze 95 mm. Detekcję densytometryczną prowadzono stosując długość fali 288 nm.Walidując metodę wykazano, że jest ona liniowa w zakresie od 0,0600 do 0,1200 mg/ plamkę oraz posiada dobry współczynnik korelacji r= 0,98220. Ponadto cechuję ją duża czułość LOD wynosi 0,0142 mg/plamkę a LOQ wynosi 0,0429 mg/plamkę. Metoda jest specyficzna oraz precyzyjna -wartość RSD dla precyzji nie przekracza 1,09%, natomiast dla precyzji pośredniej 1,99%. Powyższe dane świadczą o tym, że opracowana metoda umożliwia oznaczenie nadyfloksacyny obok produktów jej fotodegradacji.Ponadto, sprawdzono podatność nadyfloksacyny na proces fotodegradacji pod wpływem promieniowania UV. Na podstawie wyników stwierdzono, że proces ten zachodzi on zgodnie z kinetyką dla reakcji pierwszego rzędu.Nadifloxacin belongs to the second generation of fluoroquinolones which act by blocking topoisomerase II and IV, resulting in inhibition of DNA replication and death of the bacterial cell. It is mainly used in external forms of single-component and combined drugs with an indication of skin and soft tissue infections of bacterial etiology. The main purpose of this work was to develop a thin-layer chromatography method with densitometric detection and its validation, to determine nadifloxacin next to its photodegradation products. The stationary phase was HPTLC LiChrospher plates and the mobile phase was a mixture of dichloromethane - ethanol - toluene - 25% ammonia - n-butanol - water (6: 6: 2: 1.8: 3: 1 v/v/v/v/v/v) on the path of 95mm. Densitometric detection was performed using a wavelength of 288 nm.The method was validated. The linear range was 0.0600 to 0.1200 mg / spot and has a good correlation coefficient r = 0.98220. The method is highly sensitive - LOD is 0.0142 mg / spot, LOQ is 0.0429 mg / spot. What’s more it is specific and precise - the RSD value for precision does not exceed 1.09%, while for intermediate precision does not exceed 1.99%. The above data prove that the developed method enables the determination of nadifloxacin next to its photodegradation products.Moreover, the susceptibility of nadifloxacin to the process of photodegradation under the influence of UV radiation was tested. Based on the results, it was found that this process follows the kinetics of the first order reaction