La [bêta](1,6)-glucanase de Streptomyces sp. EF-14, un actinomycète antagoniste a Phytophthora spp. production, purification et caractérisation

Dans le sol, le phénomène d'antibiose entre divers microorganismes résulte en une production d'agents inhibiteurs variés, tels des métabolites secondaires et des enzymes hydrolytiques. Au laboratoire, on a isolé des bactéries, appartenant au groupe des Actinomycètes, antagonistes au Phytophthora. La paroi du Phytophthora est en grande partie constituée de glucanes, lesquels sont des polymères formés de molécules de D-glucose, reliées ensemble par un lien de type [bêta]. Ainsi, les actinomycètes capables de lyser une telle paroi produisent des [bêta]-glucanases. Nous avons étudié les glucanases chez une souche retenue pour ce projet, soit EF-14. Cette souche a été choisie préférentiellement parmi d'autres pour son efficacité a inhiber la croissance du Phytophthora et surtout, pour son excellente production de [bêta]-glucanases. Étant donné la structure particulière des glucanes de la paroi de Phytophthora, une attention spéciale a été portée aux [bêta](1,6)-glucanases. La stratégie de recherche adoptée a été la suivante : la production des [bêta](1,6)-glucanases par la souche EF-14 a été optimisée et standardisée et ce, dans un milieu à base de levure de Candida. Ensuite, nous sommes passes a la purification de la [bêta](1,6)-glucanase. Les protéines extracellulaires produites par EF-14 ont été préalablement précipitées à l'éthanol 95%, puis séparées sur différentes colonnes chromatographiques, jusqu'a homogénéité de la [bêta](1,6)-glucanase. Les caractéristiques biochimiques de cette dernière, telles que le pH et la température optimaux, le poids moléculaire, le Km et le Vmax ont été déterminées. On a enfin pu obtenir la séquence N-terminale en acides aminés de la [bêta](1,6)-glucanase et ce, en vue du clonage du gene codant pour cette meme proteine."--Résumé abrégé par UMI