Étude génétique de la neurofibromatose de type 1 : diagnostic moléculaire et recherche de mutations

La neurofibromatose de type 1 (NF1) est une maladie autosomique dominante. Elle affecte toutes les ethnies avec une incidence de 1 pour 3500 naissances. 50% des cas sont d'origine familiale et 50% sont sporadiques. L'expression de cette maladie est très variable et la fréquence des mutations nouvelles est très élevée, ce qui pose un problème dans le diagnostic clinique. En effet, le diagnostic moléculaire grâce à l'étude de linkage des haplotypes avec des marqueurs de polymorphismes de l'ADN est la solution pour les cas familiaux. Par contre pour les cas sporadiques, l'identification des mutations liées à la maladie est la seule solution. Dans ce travail, nous avons analysé les haplotypes de neuf familles NF1 de la province de Québec en utilisant des marqueurs très informatifs de type microsatellites et un marqueur RFLP. Ces marqueurs nous ont permis d'identifier l'allèle mutée et par conseéquent un diagnostic présymptomatique ou prénatal partiel de la maladie NF1 est possible. Grâce à ces marqueurs, il a été possible d'identifier deux délétions dues à une perte d'hétérozygotie chez deux familles. Chez huit individus NF1 sporadiques, nous avons analysé les produits d'amplification de tout l'ADNc par RT-PCR afin d'éviter d'analyser l'ADN génomique de NF1 qui est de grande taille et dans le but d'identifier les mutations de délétions ou d'insertions. Nous avons aussi essayé de mettre au point une technique de détection des mésappariements de bases par l'enzyme résolvase afin d'identifier les mutations ponctuelles du gène NF1. [Résumé abrégé par UMI