Expresión de proteoglicanos, quimiocinas y micrornas en la red reguladora del NF-ΚB y sus implicaciones en cáncer de próstata

Tesis (Doctor en Ciencias Biomédicas) -- Universidad de Cartagena. Instituto de Investigaciones Inmunológicas. Doctorado en Ciencias Biomédicas, 2018El cáncer es el resultado de la activación anormal de programas de crecimiento en las células. La mayoría de los oncogenes y genes supresores de tumores son componentes de vías de señalización que controlan la entrada o salida del ciclo celular, promueven diferenciación, están involucrados en mecanismos de reparación del ADN o regulan programas de muerte celular. Una de estas vías de señalización importantes en el cáncer de próstata corresponde a la superfamilia de factores de transcripción del Factor Nuclear kappa B (NFB), la cual se ha encontrado activada de forma constitutiva en un significativo número de cánceres humanos. En este estudio evaluamos la expresión y función de tres grupos genes que se encuentran regulados por este factor de transcripción: proteoglicanos, quimiocinas proinflamatorias y micro RNAs. Para explorar las posibles implicaciones de estos genes en la progresión del cáncer de próstata el presente estudio evaluó su expresión en líneas celulares normales y de cáncer de próstata con diferente potencial metastásico, lo cual permitió seleccionar genes diferencialmente expresados para estudiar su función mediante ensayos de silenciamiento génico mediado por siRNAs y en células cancerosas tratadas con antiinflamatorios no esteroideos. El efecto de estos tratamientos fue evaluado a nivel de mRNA, proteínas y del fenotipo celular. Los ensayos de RT-qPCR y ELISA revelaron niveles más altos de ESM-1 y varias quimiocinas CXC en células PC-3 metastásicas en comparación con las células PWR-1E no tumorigénicas. Otros genes diferencialmente expresados fueron FMOD, ESM-1, LUM, BGN, CXCL3, CCRL2 y micro RNAs como miR-146a-5p, Let-7f5p, miR-195-5p, miR-9 y miR-155-5p. La transfección de células PC-3 con el siRNA para ESM-1 disminuyó la migración celular sin efecto sobre la proliferación, y estuvo acompañado de una disminución de la expresión de la quimiocina angiogénica CXCL3. También se encontró una asociación entre el fenotipo metastásico y la expresión del receptor atípico de quimiocinas CCRL2. El tratamiento de las células PC-3 con Ibuprofeno mostró que esta vía regula positivamente algunos proteoglicanos como FMOD, LUM, EPYC, ECM2, mientras que PRELP resultó sobre-expresado en las células PC-3 tratadas con este AINE. Estos resultados constituyen un punto de partida para estudios posteriores que determinen el papel biológico y las posibles implicaciones clínicas de la expresión ESM-1, FMOD, CXCL3 y CCRL2 en el cáncer de próstata