Engenharia evolutiva: produção de bioplástico utilizando resíduos

Conventional plastics play a crucial role in society and have a negative impact on the environment and, therefore, bioplastics, such as polyhydroxyalkanoates (PHAs), become sustainable alternatives due to their biocompatibility and biodegradability. In this work, the production of PHAs by mixed microbial cultures (MMC) from an industrial waste, following a circular economy logic was studied. The valorization of a waste from the coffee industry, spent coffee grounds (SCGs) was another aim of this work. SCGs are a cheap raw material, constituted by high amounts of organic compounds, such as polysaccharides and lipids, and are, therefore, considered as a good substrate for biotechnological processes. In this work, the production of PHAs followed the three-step process: first, acidogenic fermentation (AF) of SCGs occurs, then the selection of a MMC with PHAs accumulation capacity and, finally, the accumulation of biopolymer. The application of a pre-treatment facilitated the process of AF that ran in a fluidized bed biofilm reactor (FBBR). Acetic, propionic, and butyric acids were the most produced short-chain organic acids (SCOAs), and valeric acid appeared in lower concentrations. The maximum concentration of SCOAs produced was 3.25 gCOD/L, and the maximum acidification levels were 58±3.0% and 37±3.5% for the supplied sugars and the total organic carbon available, respectively. The selection step occurred in a sequential discontinuous reactor (SBR) and the operating conditions tested allowed selecting a stable PHA-accumulating MMC. Two pseudo-stationary states (PSS) were possible to define and a maximum PHAs content of 40.0 % of a copolymer of hydroxybutyrate and hydroxyvalerate was obtained, thus demonstrating the good accumulation capacity of MMC. In the last step of the work, three accumulation tests were performed in which different substrates supplied to the selected MMC were tested. The test performed with the FBBR effluent showed a maximum accumulation of 60.8 % and a volumetric yield of 0.252 gPHA/L.h. This work demonstrated the potential of SCGs as substrate to produce PHAs by MMC, opening the possibility of its implementation at the industrial level.Os plásticos convencionais têm desempenhado um papel crucial na sociedade e têm impacto negativo no meio ambiente e, por isso, os bioplásticos, como os polihidroxialcanoatos (PHAs), tornaram-se alternativas sustentáveis devido à sua biocompatibilidade e biodegradabilidade. Neste trabalho, estudou-se a produção destes PHAs por culturas microbianas mistas (MMC), a partir de resíduos industriais, seguindo uma lógica de economia circular. A valorização de um resíduo da indústria de café, como as borras de café (SCGs), foi outro dos objetivos deste trabalho. As SCGs são uma matéria-prima barata, constituída por grandes quantidades de compostos orgânicos, como polissacáridos e lípidos, e, por isso, é considerada um bom substrato para processos biotecnológicos. Neste trabalho a produção de PHAs seguiu o processo em três passos: primeiro ocorre a fermentação acidogénica (AF) das SCGs, depois a seleção de uma cultura microbiana com capacidade de acumulação de PHA e, por fim, a acumulação de biopolímero. Verificou-se que a aplicação de um pré-tratamento facilitava o processo de AF que decorreu num reator de biofilme de leito fluidizado (FBBR). Os ácidos acético, propiónico e butírico foram os ácidos orgânicos de cadeia curta (SCOAs) mais produzidos, sendo que ácido valérico apareceu em menores concentrações. A máxima concentração de SCOAs produzidos foi de 3.25 gCOD/L e os graus de acidificação máximos foram 58 ± 3,0 % e 37 ± 3,5% em relação aos açúcares fornecidos e ao total do carbono orgânico disponível, respetivamente. O passo de seleção ocorreu num reator descontínuo sequencial (SBR) e as condições operacionais foram testadas de forma a selecionar uma cultura acumuladora de PHA estável. Foi possível definir dois estados pseudoestacionários (PSS) e obteve-se um conteúdo máximo 40,0 % de um copolímero de hidroxibutirato e hidroxivalerato, demonstrando assim a boa capacidade de acumulação da MMC. No último passo do trabalho, foram realizados três testes de acumulação em que se testaram diferentes substratos fornecidos à MMC selecionada. O teste realizado com o efluente do FBBR apresentou uma acumulação máxima de 60,8 % e uma produtividade volumétrica de 0,252 gPHA/L.h. Este trabalho demonstrou o potencial das SCGs como substrato para a produção de PHAs por MMC, abrindo a possibilidade da sua implementação a nível industrial.Mestrado em Biotecnologi