Evaluation of the bioative potential of medicinal plants of the genus Hyptis natives of the brazilian cerrado

Tese de Doutoramento em Ciências (Área do Conhecimento em Biologia)Plantas do gênero Hyptis distribuídas por regiões tropicais e subtropicais apresentam grande utilização na medicina tradicional para tratamento de distúrbios gastrointestinais, infecções na pele, úlceras, inflamação, dores, câncer, problemas respiratórios, gripe, cãibras, malária, secreções nos brônquios, febre e infecções por microrganismos. Mesmo com toda a demanda para fins medicinais, faltam estudos que comprovem cientificamente seus benefícios à saúde humana. O objetivo desta Tese foi avaliar a atividade antimicrobiana, antioxidante, citotóxica, citoprotetora e anti-inflamatória in vitro de extratos de folhas de Hyptis marrubioides (Hm), Hyptis pectinata (Hp) e Hyptis suaveolens (Hs) oriundas do cerrado brasileiro, bem como determinar seu perfil fitoquímico. Além disso, culturas de células em suspensão (CCS) destas espécies foram estabelecidas, eliciadas com estressores bióticos e abióticos e avaliadas quanto à produção de ácido rosmarínico (AR). A presença de ácidos fenólicos nos extratos foi confirmada por HPLC-DAD, bem como a presença de flavonóis e flavonas. CCS de Hs eliciadas com MeJ e de Hm eliciadas com MeJ e AS demostraram um significativo aumento de AR quando comparadas ao controle. Nos ensaios antioxidantes os extratos atingiram EC50 a diferentes concentrações e, portanto, apresentaram potencial antioxidante para as diferentes metodologias utilizadas. Nos ensaios antimicrobianos, verificou-se atividade antibiótica frente as cepas S. aureus (ATCC® 25923TM), S. aureus (ATCC® 29213TM), E. coli (ATCC® 10536TM), S. Cholerasuis (ATCC® 10708TM), P. aeruginosa (ATCC® 9027TM) e P. aeruginosa (ATCC® 27853TM) o que corrobora a utilização destas plantas na medicina tradicional. Os extratos também, indicaram efeitos não citotóxicos e ação antioxidante ao protegerem as células HepG2 de danos induzidos por insultos oxidativos, em condições de co-tratamento e pré-tratamento. Constatou-se que os extratos à concentração de 100μg/ml atuaram no controle da produção de EROs induzidos por t-BHP garantindo o efeito citoprotetor. Os extratos de Hp e Hs promoveram a inibição da produção de NO em células BV2 sem prejuízo da viabilidade demostrando uma possível ação anti-inflamatória. As informações contidas neste trabalho proporcionam auxílio para futuros estudos que busquem compreender a relação entre os metabólitos secundários presentes nos extratos e os mecanismos implícitos a suas potencialidades antioxidante, anti-inflamatória e citoprotetora.Hyptis plants distributed in tropical and subtropical regions are widely used in traditional medicine to treat gastrointestinal disorders, skin infections, ulcers, inflammation, pain, cancer, respiratory problems, influenza, cramps, malaria, bronchial secretions, fever and infections by microorganisms. Even with all the demand for medicinal purposes, studies that scientifically prove its benefits to human health are lacking. The aim of this thesis was to evaluate the in vitro antimicrobial, antioxidant, cytotoxic, cytoprotective and anti-inflammatory activity of extracts of Hyptis marrubioides (Hm), Hyptis pectinata (Hp) and Hyptis suaveolens (Hs) from the Brazilian Cerrado as well as to determine your phytochemical profile. In addition, suspension cell cultures (SCC) of these species were established, elicited with biotic and abiotic stressors and evaluated for rosmarinic acid (AR) production. The presence of phenolic acids in extracts was confirmed by HPLC-DAD, as well as the presence of flavonols and flavones. SCC of Hs elicited with MeJ and of the Hm elicited with MeJ and AS showed a significant increase in AR when compared to the control. In the antioxidant assays the extracts reached EC50 at different concentrations and, therefore, presented antioxidant potential for the different methodologies used. In the antimicrobial assays, antibiotic activity was verified against S. aureus (ATCC® 25923TM), S. aureus (ATCC® 29213TM), E. coli (ATCC® 10536TM) strains. , S. Cholerasuis (ATCC® 10708TM), P. aeruginosa (ATCC® 9027TM) and P. aeruginosa (ATCC® 27853TM) which corroborates the use of these plants in traditional medicine. The extracts also indicated non-cytotoxic effects and antioxidant action while protecting HepG2 cells from damage induced by oxidative insults under cotreatment and pretreatment conditions. It was found that extracts at 100μg / ml concentration controlled the production of t-BHP-induced ROS guaranteeing the cytoprotective effect. The extracts of Hp and Hs promoted the inhibition of NO production in BV2 cells without impairing viability showing a possible antiinflammatory action. The information contained in this work provides help for future studies that seek to understand the relationship between the secondary metabolites present in the extracts and the mechanisms implicit to their antioxidant, anti-inflammatory and cytoprotective potentialities