Rôle des microdomaines lipidiques dans le développement synaptique induit par la glie

Les cellules gliales sécrètent différents facteurs dont le cholestérol qui favorisent le développement et l'activité des synapses. J ai travaillé à élucider les mécanismes par lesquels ce cholestérol dirige la formation de synapses, en utilisant un système de culture de neurones immuno-purifiés. A partir d'analyses avec biopuces, nous avons montré que ces facteurs gliaux dont le cholestérol modulent l'expression génique de ces neurones. Certaines de ces variations géniques ont été confirmées au niveau protéique. D autre part, ces facteurs induisent une différentiation neuronale en favorisant la formation d'axones avec ankyrine-G au niveau du segment initial. Enfin, je me suis intéressé à l'étude des microdomaines lipidiques, très riches en cholestérol et impliquées dans de nombreuses fonctions cellulaires. Plusieurs approches complémentaires de biochimie et de microscopie ont montré que le cholestérol induit la formation ces microdomaines à la membrane plasmique des neurones.Glia-derived soluble factors including cholesterol enhance the formation and efficacy of synapses in cultures of purified retinal ganglion cells (RGC). The aim of my project was to investigate how these factors promote synapse formation in RGC. As a first step, we tested whether these factors affect gene expression by oligonucleotide microarrays; and saw that they modified transcript levels for some genes. Those results were confirmed at the protein level. Second, I studied whether glial signals also influenced axonal differentiation. I found that glial factors induced the clustering of ankyrin-G at the axonal initial segment meaning that they promote axonal differentiation. Finally, I investigated lipid rafts, which contain cholesterol and are involved in many cellular processes. Several complementary approaches biochemical method and light microscopy revealed that glia-derived cholesterol induces the formation and modification of lipid rafts in plasma membrane of RGC