Synthesis and evaluation of fluorescente and antiviral properties of a new class of nucleosides analogues, on the reverse transcriptase of HIV-1

Le virus d'immunodéficience humaine (VIH) représente actuellement une des causes de mortalité mondiale. La trithérapie a permis d'améliorer de façon considérable les conditions de vie des patients mais des efforts restent encore à fournir pour essayer de palier à un certain nombre de problèmes (coût important des traitements pour les PED, émergence de souches résistantes ). Une étape particulière du cycle viral a retenue nos efforts : la rétrotranscription catalysée par la Rétro Transcriptase (RT). Nous avons cherché à développer de nouveaux analogues nucléosidiques qui grâce à leurs propriétés de fluorescence nous permettraient de mieux comprendre les mécanismes qui régissent les interactions acide nucléique/ acide nucléique ou acide nucléique/ protéine. Ainsi la 8-vinyl-dA et la 8-thiényl-dA ont été préparées, caractérisées et ont démontré une plus grande sensibilité par rapport à la sonde de référence, la 2-aminopurine.Par ailleurs, une nouvelle classe d'analogues nucléosidiques modifiés en position 8 de la dA a été conçue permettant de mettre en évidence, dans une étude modèle, un mode d'inhibition différent des terminateurs d'élongation de la chaîne d'ADN actuellement utilisés en clinique. Ces analogues ont également été préparés sous leur forme nue et sous la forme de prodrogue phosphoramidate et testés in vitro. Aucune activité antivirale significative n a cependant été décelée. Pour essayer d'apporter des éléments de réponse, il était nécessaire de les préparer sous leur forme mono-, di- et triphosphate. Dans une première étape nous avons mis au point une méthode de synthèse originale de ces analogues monophosphorylés s'appuyant sur la chimie en phase solide.HIV has become unfortunately one of the major causes of death around the world. The HAART therapy present a lot of benefits especially in improving patient s way of life, but more efforts still need to be done to overcome some disadvantages (high cost for developing countries, resistant mutations ). We focused our efforts on a special step of the replication cycle: the Reverse Transcription. Therefore we developed new nucleosides analogs that could be useful to better understand the interaction that occurs in nucleic acid/ nucleic acid or nucleic acid/ protein complexes thanks to their fluorescent properties. The 8-vinyl-deoxyadenosine and the 8-thienyl-deoxyadenosine were then prepared, caracterized and compared to the most used fluorescent probe, the 2-Amino-purine and showed a higher sensitivity.Moreover a new class of deoxyadenosine nucleoside analogues, modified on their C-8 position was designed, synthesized and evaluated as inhibitors of the Reverse Transcriptase. Those compounds appeared to act with a different mechanism compared to DNA chain terminator. Theye were also tested either in their naked form or as phosphoramidate prodrugs on infected cell culture, but did not show any antiviral activity. In order to get further insight about this discrepancy it was necessary to test those analogues as mono, di or thiphosphate. In a first step, the modified nucleosides were prepared as their corresponding monophosphates using a new method based on phosphonate chemistry on solid support