Efecto de los leucocitos sobre la lesión por almacenamiento en plaquetas de aféresis

Tesis (Tecnólogo Médico)Durante el almacenamiento en el Banco de Sangre, las plaquetas sufren una serie de cambios físicos, metabólicos y fisiológicos que se denominan lesión por almacenamiento (LA). La LA depende de varios factores, entre los que destacan: métodos de preparación del concentrado, tipo de bolsa utilizado para su almacenamiento, la concentración de plaquetas y el número de leucocitos presentes en la unidad, acumulación de citoquinas, etc. Todos estos factores podrían producir activación plaquetaria y así afectar la calidad del producto, con lo cual se reflejaría en la sobreviva acortada de las plaquetas transfundidas. Basándose en lo anterior, la hipótesis de trabajo fue que la remoción precoz de los leucocitos atenuará la LA en los CPs obtenidos por aféresis. Por tanto, el objetivo de esta investigación fue determinar el papel que juegan los leucocitos en la LA, su contribución al fenómeno de activación de las plaquetas e inducción de la muerte celular prematura. Se estudiaron veinte CP obtenidos mediante dos métodos de aféresis que difieren en el número de leucocitos residuales que permanecen en el producto final, obteniéndose así un CP leucorreducido (Cobe Spectra) y otro estándar (Baxter CS 3000 plus). Las determinaciones se realizaron el día cero (pre-almacenamiento) y el quinto día de almacenamiento. La evaluación de la LA incluía marcadores de la membrana plaquetaria como p-selectina (CD62-P), glicoproteína Ib (CD42b), Fosfatidilserina (Ax. V) y Factor Tisular (CD142) y formación de MPs, los cuales se analizaron por citometría de flujo y citoquinas liberadas por los leucocitos y10 plaquetas activadas (IL-1, IL-6, FNT y RANTES), las cuales se analizaron por la técnica de ELISA. El principal marcador de activación de las plaquetas (p-selectina) se encontró significativamente aumentado en los CP leucorreducidos (p: 0.001) y en los obtenidos en forma estándar (p: 0.02). La expresión de GPIb disminuyó significativamente sólo en las plaquetas no leucorreducidas (p: 0.01). En relación a la actividad procoagulante de las plaquetas, se observó un aumento significativo en la expresión de FS sobre la cara externa de la membrana (p: 0.019) y de MP plasmáticas (p: 0.025) sólo en las plaquetas leucorreducidas; estos cambios se acompañaron de un muy leve aumento en la expresión de FT (p: 0.055). La determinación de citoquinas solubles no mostró cambios significativos con el almacenamiento de plaquetas. Nuestros resultados demuestran que los leucocitos presentes en los concentrados de plaquetas obtenidas por aféresis, no juegan un papel importante en la llamada lesión por almacenamiento. Por otra parte, encontramos que, si bien existen cambios en las plaquetas durante su envejecimiento in vitro, éstos son muy leves e inesperadamente fueron más significativos en las unidades leucorreducidas